Антиядерные антитела (антинуклеарные) Ig(A+M+G)

Краткая История:
История антиядерных антител (АНА) неразрывно связана с изучением системной красной волчанки (СКВ). Первое описание феномена, который позже стал основой для выявления АНА, принадлежит американскому гематологу Малкольму Харгривзу. В 1948 году он описал в костном мозге пациентов с СКВ особые клетки, названные «LЕ-клетками» (Lupus Erythematosus cells). Эти клетки представляли собой нейтрофилы, фагоцитировавшие ядерный материал других клеток, что происходило под действием аутоантител в сыворотке больного. Позже, в 1957 году, был разработан метод непрямой иммунофлюоресценции (нРИФ) на срезах тканей (изначально на печени крысы, затем на перевиваемой культуре клеток человека НЕр-2), который стал «золотым стандартом» скрининга АНА. Открытие АНА стало революционным, позволив не только диагностировать СКВ, но и открыв путь к пониманию аутоиммунных механизмов многих других ревматических болезней. Сегодня АНА – один из самых востребованных тестов в ревматологии.

Материал, используемый для исследования:
Для определения антиядерных антител (АНА) класса IgG используется сыворотка венозной крови пациента. Кровь берется из вены в вакутейнер без антикоагулянта или с активатором свертывания для получения сыворотки.

Как подготовиться к анализу:
Подготовка к анализу на АНА стандартна для большинства серологических тестов:

1. Время сдачи:Рекомендуется сдавать кровь утром, натощак (после 8-12 часов голодания). Допускается легкий ужин накануне. Пить чистую воду разрешается.
2. Лекарства:Сообщите врачу обо всех принимаемых препаратах. Некоторые лекарства могут индуцировать выработку АНА и даже вызывать лекарственную волчанку (например, Гидралазин, Прокаинамид, Изониазид, Хинидин, некоторые ингибиторы ФНО-α, Карбамазепин, Фенитоин). Вопрос об их временной отмене решает лечащий врач. Не отменяйте препараты самостоятельно!
3. Инфекции:Острые инфекции (вирусные, бактериальные) могут вызывать транзиторное повышение титра АНА. По возможности, анализ следует сдавать вне острого инфекционного периода.
4. Курение и алкоголь:Исключить за 24 часа до исследования.
5. Физическая и эмоциональная нагрузка:Избегать интенсивных физических нагрузок и стрессов накануне и в день сдачи. Перед забором крови отдохните 10-15 минут.
6. Инструментальные исследования:Рентген, КТ, МРТ, физиопроцедуры нежелательны накануне теста.

Описание данного вещества:
Антиядерные антитела (АНА) – это большая и разнообразная группа аутоантител класса IgG (реже IgM, IgA), направленных против компонентов собственного клеточного ядра (нуклеарных антигенов). Мишенями АНА могут быть:

• ДНК:Двухцепочечная (нативная, dsDNA) и одноцепочечная (ssDNA).
• Гистоны:Белки, упаковывающие ДНК в хромосомы.
• Нуклеопротеины:Комплексы ДНК/РНК с белками (Sm, U1-RNP).
• Ядерные ферменты и белки:Топоизомераза I (Scl-70), аминоацил-тРНК синтетазы (Jo-1, PL-7, PL-12 и др.), PCNA, Ku.
• Белки ядрышка:РНК-полимераза I, PM-Scl, NOR-90, фибрилларин.
• Белки центромеры:CENP-A, B, C.
• Цитоплазматические антигены:Митохондриальные (AMA), рибосомальные (анти-P), сигнально-распознающие частицы (SRP).

Обнаружение АНА указывает на наличие аутоиммунного процесса, при котором иммунная система ошибочно атакует компоненты собственных клеток. Наиболее характерны АНА для системных аутоиммунных ревматических заболеваний (САРЗ).

Диагностика заболеваний:
Тест на АНА IgG является основным скрининговым тестом для выявления системных аутоиммунных ревматических заболеваний (САРЗ), таких как:

1. Системная красная волчанка (СКВ):АНА выявляются у 95-99% пациентов. Особенно специфичны для СКВ антитела к dsDNA и анти-Sm.
2. Системная склеродермия (ССД):АНА положительны у 90-95% пациентов. Характерны специфические АНА: анти-Scl-70 (диффузная форма), антицентромерные антитела (лимитированная форма, CREST-синдром), анти-RNA-полимераза III.
3. Синдром Шегрена:АНА положительны у 70-80% пациентов. Часто выявляются анти-SSA/Ro и анти-SSB/La.
4. Идиопатические воспалительные миопатии (дерматомиозит, полимиозит):АНА положительны у 60-80% пациентов. Специфичны антитела к аминоацил-тРНК синтетазам (анти-Jo-1 и др.), анти-Mi-2, анти-SRP, анти-TIF1γ.
5. Смешанное заболевание соединительной ткани (СЗСТ):Характерно наличие антител к U1-RNP в высоких титрах.
6. Ревматоидный артрит (РА):АНА могут выявляться у 30-50% пациентов (обычно в низких титрах), но не являются основными диагностическими маркерами (важнее РФ и АЦЦП).
7. Аутоиммунные заболевания печени:Первичный билиарный холангит (ПБХ, АМА), аутоиммунный гепатит (АИГ).

Цель исследования:
Основные цели назначения анализа на АНА IgG:

1. Скрининг на системные аутоиммунные ревматические заболевания (САРЗ):При наличии клинических симптомов, позволяющих заподозрить СКВ, ССД, синдром Шегрена, миозит (необъяснимая сыпь на лице, фотосенсибилизация, артриты, синдром Рейно, мышечная слабость, сухость глаз/рта, лихорадка неясного генеза, плеврит/перикардит, поражение почек, лейкопения/тромбоцитопения).
2. Дифференциальная диагностика:Разграничение САРЗ от других состояний, имитирующих их симптомы (инфекции, онкология, другие ревматические болезни).
3. Оценка риска развития САРЗ:У пациентов с неспецифическими симптомами (например, изолированный синдром Рейно, артралгии) или у родственников больных САРЗ (отягощенный семейный анамнез).
4. Прогнозирование течения заболевания:Определение спектра АНА (с помощью референс-тестов: нРИФ на клетках НЕр-2, иммуноблот, ИФА к специфическим антигенам) помогает уточнить диагноз конкретного САРЗ и иногда предсказать особенности его течения и риск развития специфических осложнений (например, анти-dsDNA и люпус-нефрит при СКВ; анти-Scl-70 и интерстициальная болезнь легких при ССД).

Что значат полученные результаты:

• Отрицательный результат (АНА не обнаружены):Значительно снижает вероятность наличия СКВ или других САРЗ, но не исключает их полностью. Некоторые формы САРЗ (например, СКВ с преимущественно почечным или неврологическим поражением) могут быть серонегативными по АНА в редких случаях. Также АНА могут отсутствовать на ранней стадии болезни. Отрицательный результат при наличии клиники требует повторного тестирования или углубленного обследования.
• Положительный результат (АНА обнаружены):Требует обязательной интерпретации врачом-ревматологом в контексте клинической картины.
  • Титр:Указывает на концентрацию антител. Результат выдается в виде титра (например, 1:160, 1:320, 1:640 и т.д.) и описания типа свечения (если метод – нРИФ). Более высокие титры (обычно ≥1:320) чаще ассоциированы с САРЗ, чем низкие титры (1:80, 1:160). Однако низкие титры не исключают диагноз, а высокие – не всегда его подтверждают.
  • Тип свечения (при нРИФ):Может дать предварительную информацию о возможной мишени антител и, следовательно, о вероятном заболевании:
    • Гомогенное (диффузное):Анти-ДНК, анти-гистоны (СКВ, лекарственная волчанка).
    • Периферическое (краевое):Анти-dsDNA (специфично для СКВ).
    • Крапчатое (пятнистое, speckled):Наиболее часто. Анти-Sm, U1-RNP, SSA/Ro, SSB/La, Scl-70, Jo-1 и др. (Разные САРЗ).
    • Нуклеолярное:Анти-PM-Scl, РНК-полимераза I, фибрилларин, Th/To (ССД).
    • Центромерное:Антицентромерные антитела (лимитированная ССД, CREST).
    • Цитоплазматическое:Анти-синтетазы (Jo-1), анти-SRP, анти-митохондриальные (ПБХ), анти-рибосомальные (СКВ).
  • Специфичность:Положительный скрининговый тест на АНА всегда требует проведения референс-тестов для определения специфичности антител (ИФА к dsDNA, иммуноблот на экстрагируемые ядерные антигены — ENA screen). Обнаружение специфических АНА (анти-dsDNA, анти-Sm, анти-Scl-70, антицентромерные, анти-Jo-1, анти-SSA/Ro и др.) имеет гораздо большее диагностическое значение, чем просто положительный АНА скрининг, и помогает точно верифицировать диагноз конкретного САРЗ.
  • Ложноположительные результаты:Могут встречаться у пожилых людей (до 10-15%), при хронических инфекциях (туберкулез, гепатиты, инфекционный эндокардит), онкологических заболеваниях, других аутоиммунных заболеваниях (аутоиммунный тиреоидит), у здоровых родственников больных САРЗ, иногда при приеме лекарств.

Факторы, влияющие на результат:

1. Метод исследования:«Золотым стандартом» скрининга является непрямая иммунофлюоресценция (нРИФ) на клеточной линии НЕр-2. Этот метод не только выявляет факт наличия АНА, но и дает информацию о типе свечения. ИФА-скрининг (без определения специфичности) может быть менее чувствительным к некоторым типам АНА (особенно антицентромерным, анти-DFS70) и не дает информации о типе свечения.
2. Качество тест-системы:Использование аттестованных и валидированных тест-систем критично.
3. Интерпретация свечения:Требует высокой квалификации лаборанта/врача КЛД.
4. Титр:Результат выдается в титрах. Диагностически значимым обычно считается титр ≥1:160 (зависит от референсных значений лаборатории). Титры ниже (1:40, 1:80) часто встречаются у здоровых лиц, особенно пожилых.
5. Возраст:Частота ложноположительных низких титров АНА увеличивается с возрастом (до 10-37% у людей старше 65 лет).
6. Инфекции:Могут вызывать транзиторное повышение титра.
7. Лекарства:Могут индуцировать АНА и клинику лекарственной волчанки.
8. Определение специфичности:Положительный скрининг АНА обязательно должен сопровождаться тестированием на специфические антитела (анти-dsDNA, ENA-иммуноблот) для клинической интерпретации.

Анализ на антиядерные антитела (АНА) – незаменимый инструмент в диагностике системных ревматических заболеваний. Положительный результат – это сигнал к углубленному обследованию у ревматолога, а не диагноз. Отрицательный результат при наличии стойких подозрительных симптомов также не должен успокаивать и требует повторения теста или поиска других причин. Сочетание клинической картины, титра АНА, типа свечения и спектра специфических антител позволяет врачу поставить точный диагноз и назначить правильное лечение.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы (Антиядерные антитела):

1. Agmon-Levin N., Damoiseaux J., Kallenberg C. et al. International recommendations for the assessment of autoantibodies to cellular antigens referred to as anti-nuclear antibodies. Ann Rheum Dis.2014;73(1):17-23. (Международные рекомендации по тестированию АНА).
2. Насонов Е.Л., Александрова Е.Н. Современные стандарты лабораторной диагностики ревматических заболеваний. Клиническая лабораторная диагностика. Москва; 2015. (Русскоязычное руководство по лабораторной диагностике).
3. Meroni P.L., Schur P.H. ANA screening: an old test with new recommendations. Ann Rheum Dis.2010;69(8):1420-1422. (Обзор значения АНА скрининга).
4. Aringer M., Costenbader K., Daikh D. et al. 2019 European League Against Rheumatism/American College of Rheumatology Classification Criteria for Systemic Lupus Erythematosus. Arthritis Rheumatol.2019;71(9):1400-1412. (Классификационные критерии СКВ, где АНА — обязательный критерий).
5. Иванова М.М. Антиядерные антитела в клинической практике: интерпретация результатов. Современная ревматология. 2018;12(3):105-110. (Русскоязычный обзор по интерпретации).