Группа крови, Rh-фактор

Краткая История
Исследование групп крови – фундамент безопасной гемотрансфузии и многих аспектов клинической медицины. Отправной точкой стала революционная работа австрийского врача и иммунолога Карла Ландштайнера в 1901 году. Экспериментируя со смешиванием крови разных людей, он обнаружил, что сыворотка одних людей агглютинирует (склеивает) эритроциты других. Это привело к выделению трех основных групп крови: A, B и O. Его ученики, Альфред фон Декастелло и Адриано Штурли, добавили четвертую группу – AB – в 1902 году. За свое открытие Ландштайнер получил Нобелевскую премию по физиологии и медицине в 1930 году.

Следующий прорыв произошел в 1940 году, когда Карл Ландштайнер и Александр Винер открыли Rh-фактор (названный в честь макак-резусов, использовавшихся в экспериментах). Они иммунизировали кроликов кровью макак-резусов и получили сыворотку, которая агглютинировала эритроциты примерно 85% людей европеоидной расы. Эритроциты, агглютинируемые этой сывороткой, были обозначены как Rh-положительные (Rh+), а не агглютинируемые – как Rh-отрицательные (Rh-). Это открытие объяснило случаи тяжелых гемолитических реакций при переливании, не связанных с системой ABO, и гемолитическую болезнь новорожденных (ГБН).

Система ABO и Rh(D) (наиболее клинически значимый антиген Rh-системы) стали основополагающими в трансфузиологии и акушерстве. Сегодня известно более 40 систем групп крови, содержащих сотни антигенов, но ABO и Rh(D) остаются критически важными для первоначального типирования.

Материал, используемый для исследования

• Основной материал: Цельная кровь с антикоагулянтом (чаще всего ЭДТА — этилендиаминтетрауксусная кислота, реже цитрат). ЭДТА предотвращает свертывание крови, сохраняя эритроциты в суспензии для проведения тестов агглютинации.
• Объем образца: Обычно достаточно 1-3 мл венозной крови для стандартного определения группы ABO и Rh(D).
• Альтернативные материалы: В некоторых случаях (например, у новорожденных) может использоваться кровь из пятки или пуповины. Для определения группы в судебно-медицинской практике могут анализировать пятна засохшей крови, слюну (для выявления группоспецифических секреторных веществ) или другие биологические жидкости.

Как подготовиться к анализу
Определение группы крови и Rh-фактора – один из самых простых анализов с точки зрения подготовки пациента:

1. Специальной диеты не требуется: Можно есть и пить как обычно.
2. Ограничения приема лекарств: В большинстве случаев прием обычных лекарств не влияет на результат. Однако ОЧЕНЬ ВАЖНО сообщить врачу:
   • О недавних (в течение последних 3 месяцев) переливаниях крови или компонентов крови.
   • О пересадке костного мозга или стволовых клеток.
   • О приеме некоторых лекарств, которые могут влиять на иммунную систему или непосредственно на эритроциты (например, иммунодепрессанты, некоторые химиотерапевтические препараты, препараты, содержащие антитела).
   • О наличии заболеваний костного мозга или состояниях, связанных с нарушением синтеза нормальных эритроцитов (например, лейкозы, миелодиспластические синдромы).
3. Время сдачи: Обычно не имеет значения, но лучше придерживаться рекомендаций лаборатории.
4. Психологическая готовность: Если вы боитесь вида крови или уколов, предупредите медсестру. Процедура взятия крови стандартная и занимает несколько минут.

Описание данного вещества (Система ABO и Rh)

• Группа крови (Система ABO): Определяется наличием или отсутствием на поверхности эритроцитов специфических молекул – антигенов A и B. Эти антигены представляют собой сложные углеводы, прикрепленные к белкам и липидам мембраны эритроцита. Одновременно в плазме крови присутствуют естественные антитела (агглютинины) против отсутствующих антигенов:
  • Группа O: На эритроцитах нет антигенов A и B. В плазме присутствуют анти-А и анти-В антитела.
  • Группа A: На эритроцитах есть антиген А. В плазме присутствуют анти-В антитела.
  • Группа B: На эритроцитах есть антиген В. В плазме присутствуют анти-А антитела.
  • Группа AB: На эритроцитах есть антигены А и В. В плазме нет анти-А и анти-В антител.
• Rh-фактор (Антиген D): Это отдельная система. Наиболее важным является антиген D.
  • Rh-положительный (Rh+): Антиген D присутствует на поверхности эритроцитов (~85% населения).
  • Rh-отрицательный (Rh-): Антиген D отсутствует на поверхности эритроцитов (~15% населения). У людей с Rh- кровью нет естественных антител к Rh(D) антигену. Эти антитела (иммунные анти-D) вырабатываются только после сенсибилизации – контакта Rh- человека с Rh+ кровью (при переливании или беременности Rh+ плодом).

Гены, кодирующие антигены ABO и Rh, расположены на разных хромосомах и наследуются независимо друг от друга. Поэтому комбинация группы ABO и Rh-статуса дает 8 основных фенотипов (O+, O-, A+, A-, B+, B-, AB+, AB-).

Диагностика заболеваний
Прямое определение группы крови и Rh-фактора само по себе не является диагностикой заболевания в классическом смысле. Это идентификационная характеристика индивидуума, имеющая критическое значение в следующих клинических ситуациях:

1. Безопасное переливание крови и компонентов: Это главная цель. Переливание несовместимой по ABO крови приводит к массивному внутрисосудистому гемолизу (разрушению эритроцитов), острой почечной недостаточности, шоку и часто к смерти. Несовместимость по Rh (особенно у сенсибилизированных реципиентов) вызывает тяжелые гемолитические реакции. Знание группы и Rh донора и реципиента – абсолютное требование.
2. Ведение беременности и профилактика Гемолитической Болезни Новорожденных (ГБН):
   • Определение группы и Rh матери и отца для оценки риска Rh-несовместимости.
   • Если мать Rh-, а отец Rh+ (или статус отца неизвестен), существует риск, что плод будет Rh+. Это может привести к выработке у матери антител против Rh(D) антигена плода (сенсибилизация), особенно во время родов или других событий, вызывающих смешение крови матери и плода. Эти антитела (IgG) могут проникать через плаценту при последующих беременностях и разрушать эритроциты Rh+ плода, вызывая ГБН – тяжелое состояние, приводящее к анемии, желтухе, водянке плода и даже гибели.
   • Своевременное введение Rh-отрицательной матери анти-Rh(D) иммуноглобулина (RhoGAM) после родов Rh+ ребенка, аборта, амниоцентеза или других потенциально сенсибилизирующих событий предотвращает выработку антител и защищает будущие беременности.
3. Хирургические и инвазивные процедуры: Для экстренного обеспечения совместимой кровью в случае интраоперационного кровотечения.
4. Трансплантология: Учитывается при подборе донора органов и тканей (хотя и не является основным критерием, как HLA-типирование).
5. Судебно-медицинская экспертиза: Установление личности, спорное отцовство (хотя сейчас это делается с помощью более точного ДНК-анализа).

Цель исследования
Основные цели определения группы крови ABO и Rh(D)-фактора:

1. Обеспечение безопасности гемотрансфузионной терапии: Главная и жизненно важная цель. Предотвращение смертельно опасных трансфузионных реакций, вызванных несовместимостью по ABO и/или Rh системам.
2. Профилактика и диагностика Гемолитической Болезни Новорожденных (ГБН):
   • Выявление Rh-отрицательных беременных женщин для проведения профилактики сенсибилизации (введение анти-D иммуноглобулина).
   • Диагностика уже развившейся ГБН у новорожденного (совместно с другими тестами).
3. Подготовка к плановым хирургическим операциям: Заблаговременное определение группы и Rh пациента и заказ необходимого количества совместимых компонентов крови на случай интраоперационной кровопотери.
4. Создание индивидуальной «карты группы крови»: Занесение данных в медицинскую карту пациента для использования в экстренных ситуациях, когда нет времени на повторное тестирование (хотя в критических случаях или при отсутствии надежных данных тест всегда перепроверяется перед переливанием).
5. Подбор доноров для сдачи крови: Определение группы и Rh донора для маркировки крови и подбора подходящих реципиентов.
6. Научные и демографические исследования.

Что значат полученные результаты
Результат выдается в виде комбинации группы по системе ABO и статуса по Rh(D)-фактору:

• Примеры: O Rh+, A Rh-, B Rh+, AB Rh- и т.д.

Интерпретация:

1. Группа ABO:
   • O: Эритроциты не несут антигенов A и B. Является универсальным донором эритроцитов (но не цельной крови или плазмы!), так как их эритроциты не будут атакованы анти-А или анти-В антителами реципиента. Могут получать только кровь группы O.
   • A: Эритроциты несут антиген А. Могут получать кровь группы A и O. Могут быть донорами эритроцитов для реципиентов A и AB.
   • B: Эритроциты несут антиген В. Могут получать кровь группы B и O. Могут быть донорами эритроцитов для реципиентов B и AB.
   • AB: Эритроциты несут антигены A и B. Являются универсальными реципиентами эритроцитов (могут получать эритроциты O, A, B, AB). Могут быть донорами эритроцитов только для реципиентов AB. Их плазма не содержит анти-А/анти-В антител, поэтому они – универсальные доноры плазмы для реципиентов любой группы ABO (после подтверждения совместимости по другим системам).
2. Rh(D)-фактор:
   • Rh+ (положительный): На эритроцитах присутствует антиген D. Могут получать как Rh+, так и Rh- кровь (предпочтительно Rh+). Могут быть донорами для Rh+ реципиентов.
   • Rh- (отрицательный): На эритроцитах отсутствует антиген D. Могут получать только Rh- кровь. Если Rh- человеку перелить Rh+ кровь, высока вероятность сенсибилизации и выработки анти-D антител. Могут быть донорами как для Rh+, так и для Rh- реципиентов (их эритроциты не несут D-антигена). Особое значение для женщин: Rh- статус требует особого наблюдения во время беременности для профилактики ГБН.

Важные нюансы:

• «Универсальность» относительна: Понятия «универсальный донор» (O-) и «универсальный реципиент» (AB+) относятся в первую очередь к эритроцитарной массе и системе ABO/Rh(D). На практике всегда проводится полное перекрестное сопоставление (cross-match), тестирующее совместимость по множеству других антигенов, перед переливанием.
• Подтипы: Существуют слабые подтипы антигенов (особенно A2, A2B, слабый D (Du)). Их определение требует дополнительных методов и может влиять на совместимость и тактику ведения беременности.
• Сенсибилизация: Отрицательный результат на антитела к Rh(D) сейчас не гарантирует, что их не было или не будет в будущем, если была сенсибилизация ранее или она произойдет позже. Для беременных Rh- женщин регулярно проводится скрининг на наличие антиэритроцитарных антител (включая анти-D).

Факторы, влияющие на результат
Хотя методология определения группы крови хорошо отработана, некоторые факторы могут привести к ошибочным или трудным для интерпретации результатам:

1. Недавнее переливание крови: Если пациенту недавно (в течение 3 месяцев) переливали кровь, в его кровотоке циркулирует смесь собственных и донорских эритроцитов. Это может дать ложную картину группы крови («смешанное поле» агглютинации). Результат будет отражать группу донорской крови, а не собственную группу пациента.
2. Трансплантация костного мозга или стволовых клеток: После успешной трансплантации кроветворение обеспечивается донорским костным мозгом. Группа крови пациента изменяется на группу донора. Определение группы в этот период покажет донорский фенотип.
3. Заболевания крови:
   • Лейкозы, миелодиспластические синдромы: Могут нарушать нормальный синтез антигенов на эритроцитах, приводя к ослаблению экспрессии антигенов (феномен «ослабленных антигенов») или появлению необычных реакций.
   • Тяжелые гемолитические анемии: Массивный внутрисосудистый гемолиз может высвобождать в плазму большое количество свободных антигенов, которые могут нейтрализовать тестовые антитела, мешая реакции агглютинации.
4. Новорожденные:
   • Антигены системы ABO и Rh выражены слабее, чем у взрослых.
   • В плазме отсутствуют или присутствуют в очень низком титре естественные анти-А и анти-В антитела (они материнского происхождения и имеют класс IgM, не проникающий через плаценту). Собственные антитела начинают вырабатываться после 3-6 месяцев жизни.
   • Определение группы у новорожденных основано в основном на прямом определении антигенов на эритроцитах (прямая, или клеточная, группировка), а не на реакции с сывороткой (обратная группировка).
5. Химеризм: Наличие в организме двух популяций клеток с разным генетическим материалом (например, после трансплантации, у разнояйцовых близнецов с общим плацентарным кровообращением, после массивных трансфузий). Может давать смешанные реакции.
6. Технические ошибки:
   • Неправильный забор или хранение образца (сгустки, гемолиз, бактериальная контаминация).
   • Ошибки в маркировке пробирок.
   • Использование некачественных или просроченных реагентов.
   • Несоблюдение методики (неправильная концентрация клеток/сыворотки, время инкубации, температура, скорость центрифугирования).
   • Субъективная ошибка при чтении результатов агглютинации (особенно слабые реакции).
7. Аутоагглютинаны: Некоторые заболевания (например, холодовая агглютининовая болезнь) вызывают наличие в крови пациента антител (обычно IgM), которые агглютинируют собственные эритроциты при комнатной температуре или ниже. Это мешает проведению теста и требует специальных методов (отмывание эритроцитов теплым физраствором, тестирование при 37°C).
8. Лекарственные препараты: Некоторые лекарства (например, высокие дозы декстранов, иммуноглобулины внутривенно — ВВИГ, моноклональные антитела) могут вызывать неспецифическую агглютинацию или блокировать реакцию антиген-антитело.
9. Слабые варианты антигенов (Подтипы):
   • Слабый D (Du): Эритроциты несут очень мало молекул антигена D или его варианты, которые могут не определяться всеми стандартными анти-D реагентами. Требует дополнительного тестирования. Интерпретация (трактовать ли человека как Rh- или Rh+) зависит от лабораторного протокола и клинической ситуации (донор vs реципиент, беременная женщина).
   • Подгруппы A и B (A2, A3, Ax, B3 и др.): Экспрессия антигенов A/B может быть ослабленной или измененной, что приводит к неоднозначным реакциям с некоторыми реагентными сыворотками или обратным типированием.
10. Полиагглютинабельность эритроцитов: Состояние, при котором эритроциты агглютинируются практически любой нормальной сывороткой человека (включая собственную сыворотку пациента). Может быть вызвана инфекциями (бактериальными, вирусными), действием ферментов, воздействием лекарств или быть врожденной. Сильно затрудняет определение группы.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

1. Машков, А. Е. (Ред.). (2018). Руководство по трансфузиологии. ГЭОТАР-Медиа. (Глава 3: Группы крови человека).
2. Hoffbrand, A. V., Moss, P. A. H., & Pettit, J. E. (Eds.). (2019). Essential Haematology (7th ed.). Wiley-Blackwell. (Chapter 21: Blood transfusion).
3. Daniels, G. (2013). Human Blood Groups (3rd ed.). Wiley-Blackwell. (Comprehensive reference on blood group systems).
4. Американская Ассоциация Банков Крови (AABB). (2023). Standards for Blood Banks and Transfusion Services (33rd ed.). AABB. (Technical standards for blood grouping).
5. Reid, M. E., & Lomas-Francis, C. (2004). The Blood Group Antigen FactsBook (2nd ed.). Academic Press. (Detailed information on blood group antigens).