Анализ: Хеликобактер пилори (сум. антитела) в Луганске

Краткая История:
Долгое время считалось, что в кислой среде желудка не могут существовать бактерии. В 1875 году немецкие ученые обнаружили спиралевидные бактерии в слизистой желудка человека, но не связали их с болезнями. В 1979 году австралийский патолог Робин Уоррен вновь обратил внимание на эти бактерии у пациентов с гастритом. В 1982 году Барри Маршалл, несмотря на скепсис научного сообщества, сумел культивировать бактерию (первоначально названную Campylobacter pyloridis, позже переименованную в Helicobacter pylori). Чтобы доказать патогенную роль, Маршалл выпил культуру бактерий и заболел гастритом. Эта дерзкая самоэкспериментация и последующие исследования (включая разработку дыхательного теста и серодиагностики) перевернули гастроэнтерологию. В 2005 году Уоррен и Маршалл получили Нобелевскую премию по физиологии и медицине. Серологические тесты на суммарные антитела (IgG, IgA, IgM) к H. pylori стали важным инструментом эпидемиологии и скрининга, хотя для диагностики текущей инфекции у конкретного пациента есть более точные методы.

Материал, используемый для исследования:

• Основной материал:Сыворотка венозной крови.
• Требования к пробе:Пробирка с активатором свертывания («красная»). После взятия кровь свертывается 30-60 мин, затем центрифугируется.
• Объем:1 мл сыворотки обычно достаточно.
• Хранение и транспортировка:Сыворотка стабильна при +2…+8°C до 7 дней. Длительное хранение при -20°C. Транспортировка при +2…+8°C.

Как подготовиться к анализу:

1. Время сдачи:Любое время суток.
2. Голодание:Не требуется. Анализ можно сдавать не натощак. Однако, если кровь берется в комплексе с другими тестами, требующими голодания, лучше соблюсти общие правила.
3. Режим дня:Значительных ограничений нет. Избегайте экстремальных физических нагрузок и стресса накануне.
4. Алкоголь:Умеренное потребление накануне обычно не влияет. Сильное алкогольное опьянение может исказить результат.
5. Курение:Специальных ограничений нет, но рекомендуется не курить за 30 минут до сдачи крови.
6. Лекарственные препараты:
   • Антибиотики и препараты висмута:Если вы принимаете или недавно закончили курс эрадикационной терапии H. pylori, обязательно сообщите врачу! Антибиотики и висмут непосредственно воздействуют на бактерию и могут снижать ее количество, но уровень антител (особенно IgG) меняется медленно.
   • Ингибиторы протонной помпы (ИПП — омепразол, пантопразол и др.):Не влияют напрямую на уровень антител, но могут подавлять H. pylori и влиять на результаты других тестов на текущую инфекцию (дыхательный тест, ПЦР кала). На результат серологии ИПП влияют минимально.
   • Антисекреторные препараты (H2-блокаторы — фамотидин) и антациды:Практически не влияют на серологию.
   • Иммуносупрессанты:Могут подавлять выработку антител.
7. Недавние инфекции:Тяжелые острые инфекции могут временно влиять на общий уровень иммуноглобулинов.

Описание данного вещества:
Суммарные антитела к Helicobacter pylori – это совокупность специфических иммуноглобулинов классов G (IgG), A (IgA) и M (IgM), вырабатываемых иммунной системой человека в ответ на инфицирование бактерией H. pylori.

• IgM:Появляются первыми (через 1-2 недели после инфицирования), указывают на острую фазу. Однако их уровень быстро снижается. В клинической практике их изолированное определение используется редко.
• IgA:Вырабатываются на слизистых оболочках (местный иммунитет желудка) и в меньшей степени в системном кровотоке. Их уровень может повышаться при активном воспалительном процессе в желудке. Могут сохраняться при хронической инфекции. Определение IgA иногда используется для оценки активности гастрита, но менее распространено, чем IgG.
• IgG:Основной класс антител при хронической H. pylori-инфекции. Появляются через 3-4 недели после инфицирования и сохраняются на высоком уровне в течение всего периода инфицирования. После успешной эрадикационной терапии уровень IgG медленно снижается (в течение 6-12 месяцев, а иногда и нескольких лет), но часто не исчезает полностью. Поэтому положительный IgG после лечения не обязательно означает неудачу терапии или рецидив.
• «Суммарные антитела»:Тест ИФА чаще всего детектирует преимущественно IgG (как наиболее стабильные и долгоживущие), давая суммарный сигнал. Он является надежным маркером факта инфицирования H. pylori в настоящем или недавнем прошлом.

Диагностика заболеваний:
Серологический тест на суммарные антитела к H. pylori является важным методом для:

1. Первичной диагностики H. pylori-инфекции (Скрининг):Особенно полезен при первичном обращении пациента с симптомами диспепсии (дискомфорт в верхней части живота, изжога, отрыжка, тошнота, чувство раннего насыщения) для выяснения возможной причины (H. pylori-ассоциированный гастрит, язвенная болезнь). Его преимущество – неинвазивность и независимость от приема ИПП (в отличие от дыхательного теста или ПЦР кала).
2. Эпидемиологических исследований:Оценка распространенности инфекции H. pylori в популяции или отдельных группах.
3. Диагностики атрофического гастрита и рака желудка (в комплексе):Хроническая H. pylori-инфекция – основной фактор риска развития атрофии слизистой желудка, кишечной метаплазии и рака желудка. Серология (наряду с определением пепсиногенов I/II и гастрина-17) используется в неинвазивных алгоритмах диагностики атрофического гастрита («Серологическая биопсия желудка»).
4. Диагностики MALT-лимфомы желудка:Практически все случаи этой лимфомы ассоциированы с H. pylori. Обнаружение антител подтверждает инфекцию.

Методы подтверждения текущей инфекции (после положительного скрининга серологией или при контроле после лечения):

1. Дыхательный уреазный тест (13C-UBT, 14C-UBT):«Золотой стандарт» неинвазивной диагностики текущей инфекции. Высокоточный.
2. ПЦР кала:Выявление ДНК H. pylori в стуле. Высокоточный метод, также позволяет определить гены устойчивости к кларитромицину.
3. Антигенный тест кала (SAT):Обнаружение антигенов H. pylori в стуле. Хорошая точность.
4. Гистологическое исследование:Исследование биоптатов слизистой желудка, полученных при ФГДС (фиброгастродуоденоскопии), под микроскопом с окраской на H. pylori. Прямой метод.
5. Быстрый уреазный тест (CLO-тест):Проводится во время ФГДС на биоптате слизистой. Определяет уреазную активность бактерии.

Цель исследования:

1. Скрининг на H. pylori-инфекцию:Первичное обследование пациентов с диспепсическими жалобами (особенно моложе 45-50 лет без «тревожных симптомов») для выявления возможной инфекционной причины.
2. Диагностика H. pylori-ассоциированных заболеваний:Как часть обследования при подозрении на:
   • Хронический гастрит.
   • Язвенную болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки.
   • MALT-лимфому желудка.
   • Атрофический гастрит и состояние после резекции желудка по поводу рака (в комплексе с пепсиногенами).
3. Эпидемиологические исследования:Оценка инфицированности населения.
4. Оценка риска развития заболеваний:Выявление инфицированных лиц как группы риска по язвенной болезни и раку желудка.
5. Контроль после лечения (с оговорками):Может использоваться для предварительной оценки эффективности эрадикации через 6-12 месяцев после лечения, если исходный уровень IgG был высоким. Снижение титра IgG на 20-25% и более от исходного уровня через 6 месяцев после терапии с высокой вероятностью указывает на успешную эрадикацию. Однако отрицательный результат сразу после лечения не информативен (антитела не успели снизиться). Для надежного контроля текущей инфекции через 4-8 недель после окончания терапии предпочтительны дыхательный тест, ПЦР кала или антигенный тест кала.

Что значат полученные результаты:
Результат обычно выдается как «положительный», «отрицательный» или «сомнительный», часто с титром или коэффициентом позитивности (КП).

• Отрицательный результат (Не обнаружено):
  • Отсутствие детектируемого уровня специфических суммарных антител (преимущественно IgG) к H. pylori в крови на момент исследования.
  • Высокая вероятность:Отсутствие текущей или недавней (в течение последних нескольких месяцев-лет) инфекции H. pylori.
  • Низкая вероятность:Риск наличия H. pylori-ассоциированных заболеваний (язвы, гастрита) значительно снижен (но не исключен полностью, так как есть другие причины).
  • Ложноотрицательный возможен (редко):При очень ранней стадии инфицирования (антитела еще не выработались), у лиц с тяжелым иммунодефицитом (ВИЧ с низким CD4+, иммуносупрессия), при атрофическом гастрите с пониженной кислотностью (может влиять на выживаемость бактерии и иммунный ответ).
• Положительный результат (Обнаружено):
  • Обнаружение специфических суммарных антител (преимущественно IgG) к H. pylori в сыворотке крови.
  • Указывает на:Текущую или перенесенную в прошлом (в течение последних нескольких лет) инфекцию H. pylori.
  • Значит:Пациент инфицирован H. pylori или был инфицирован недавно (даже если проведено лечение, антитела снижаются медленно).
  • Не означает автоматически:Наличие активного заболевания (гастрита, язвы) – у многих инфицированных людей инфекция протекает бессимптомно. Однако инфицирование – это фактор риска развития этих заболеваний.
  • Действия:Положительный результат скринингового серологического теста требует подтверждения факта текущей инфекции одним из рекомендованных методов (дыхательный тест, ПЦР кала, антиген кала, ФГДС с биопсией), особенно если планируется эрадикационная терапия. Серология сама по себе не является основанием для назначения лечения. Решение о лечении принимает врач на основании клинической картины, результатов подтверждающих тестов на текущую инфекцию и наличия показаний (язва, гастрит, MALT-лимфома, атрофия, состояние после резекции по поводу рака желудка, по желанию пациента после консультации и т.д.).
• Сомнительный результат:Требует повторного исследования через 2-4 недели или использования другого метода диагностики (дыхательный тест, ПЦР кала). Может быть при низком уровне антител, в начале или в конце инфекции.

Факторы, влияющие на результат:

1. Время после инфицирования:Ранняя стадия (до 3-4 недель) – антитела IgG могут отсутствовать (ложноотрицательный). После эрадикации – антитела IgG снижаются медленно (месяцы-годы), результат может оставаться положительным, хотя инфекции уже нет.
2. Возраст:Распространенность инфекции увеличивается с возрастом. У пожилых людей положительный результат чаще отражает хроническую или перенесенную инфекцию.
3. Географический регион/Этническая принадлежность:Распространенность H. pylori варьирует, что влияет на предсказательную ценность теста.
4. Иммунный статус:
   • Иммунодефициты:Снижение выработки антител -> возможны ложноотрицательные результаты.
   • Аутоиммунные заболевания (РА, СКВ):Возможны ложноположительные результаты из-за неспецифического связывания или перекрестных реакций.
5. Прием ИПП:Практически не влияет на серологию (в отличие от дыхательного теста и ПЦР кала!). Это преимущество серологического метода для скрининга пациентов, уже принимающих ИПП.
6. Прием антибиотиков/препаратов висмута:Непосредственно во время приема или сразу после курса эрадикации может временно снижать количество бактерий, но на уровень антител (особенно IgG) влияет мало и медленно. Серология непригодна для немедленного контроля после лечения.
7. Атрофический гастрит:При выраженной атрофии и гипо-/ахилии количество H. pylori может снижаться, потенциально влияя на уровень антител (возможны ложноотрицательные или низкие титры).
8. Кровотечение из язвы:Может временно снижать титры антител.
9. Технические факторы:
   • Чувствительность и специфичность тест-системы (высокая у большинства современных ИФА, но может варьировать).
   • Качество пробы (гемолиз, хилез, иктеричность).
   • Ошибки на преаналитическом и аналитическом этапах.
10. Перекрестные реакции:Крайне редки, но теоретически возможны с антигенами других кампилобактероподобных бактерий.

Заключение:
Определение суммарных антител (преимущественно IgG) к Helicobacter pylori – это надежный, неинвазивный и удобный метод скрининга на инфицированность H. pylori, не зависящий от приема ИПП. Положительный результат свидетельствует о текущей или недавней инфекции и является показанием для обследования на предмет H. pylori-ассоциированных заболеваний (гастрит, язва) и подтверждения текущей инфекции с помощью дыхательного теста, ПЦР кала, антигена кала или ФГДС с биопсией перед назначением эрадикационной терапии. Отрицательный результат с высокой вероятностью исключает инфицирование. Для контроля успешности эрадикации сразу после лечения серология непригодна; следует использовать дыхательный тест, ПЦР кала или антиген кала через 4-8 недель после окончания терапии. Интерпретацию результатов проводит врач (терапевт, гастроэнтеролог).

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

1. Malfertheiner, P., Megraud, F., O’Morain, C. A., Gisbert, J. P., Kuipers, E. J., Axon, A. T., … & Gasbarrini, A. (2017). Management of Helicobacter pyloriinfection—the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut, 66(1), 6-30. (Международный, консенсус)
2. Chey, W. D., Leontiadis, G. I., Howden, C. W., & Moss, S. F. (2017). ACG Clinical Guideline: Treatment of Helicobacter pyloriThe American journal of gastroenterology, 112(2), 212-239. (Международный, руководство)
3. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л. и соавт. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori у взрослых. // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. – 2018. – Т. 28, № 1. – С. 55-70. (Российский, официальные рекомендации)
4. Цуканов В.В., Амельчугова О.С., Буторин Н.Н. и др. Неинвазивная диагностика инфекции Helicobacter pylori: возможности и ограничения. // Терапевтический архив. – 2019. – Т. 91, № 8. – С. 85-91. (Российский)
5. S. Food and Drug Administration (FDA). (2019). Helicobacter pylori (H. pylori) Serological Markers — Class II Special Controls Guidance for Industry and FDA Staff. (https://www.fda.gov/media/132091/download) (Международный, регуляторный)