Лактазная недостаточность (ПЦР) кровь

Краткая История:
История понимания лактазной недостаточности и открытия ключевого генетического маркера C/T(-13910) описана в предыдущей статье (по буккальному эпителию). Определение этого полиморфизма методом ПЦР стало стандартом диагностики первичной ЛН. Изначально и наиболее часто для генетических тестов использовалась венозная кровь как источник ДНК. Кровь остается «золотым стандартом» для многих ДНК-тестов благодаря высокой концентрации и качеству выделяемой ДНК. Развитие технологий позволило использовать и альтернативные материалы, такие как буккальный эпителий, но анализ по крови сохраняет свою актуальность и высокую точность для диагностики лактазной недостаточности.

Материал, используемый для исследования:

Основной материал: Венозная кровь (цельная кровь, стабилизированная антикоагулянтом ЭДТА (K2 или K3 ЭДТА) в специальной вакуумной пробирке (типа «Vacuette EDTA»).

Как подготовиться к анализу:
Подготовка к сдаче крови на генетический анализ стандартна:

Сдавать кровь рекомендуется утром, натощак. Период голодания должен составлять 8-12 часов (обычно ночной сон). В это время можно пить только чистую негазированную воду.
Накануне исследования: Придерживаться обычного рациона, но избегать переедания и употребления очень жирной пищи. Исключить алкогольные напитки.
Питьевой режим перед сдачей: Утром в день анализа можно пить воду (негазированную, несладкую).
Физические и эмоциональные нагрузки: За 30 минут до сдачи крови необходимо исключить физическое напряжение (бег, быстрый подъем по лестнице), эмоциональное возбуждение. Рекомендуется спокойно посидеть в процедурном кабинете.
Лекарственные препараты: Обычно не влияют на результат генетического теста (так как не меняют структуру ДНК). Однако обязательно сообщите врачу, направившему вас на исследование, и процедурной медсестре о всех принимаемых лекарствах.
Курение: Не курить минимум за 1 час до исследования.

Описание данного вещества (Ген LCT / Полиморфизм C/T(-13910)):
(См. подробное описание в статье по буккальному эпителию — раздел идентичен, так как исследуется тот же самый ген и полиморфизм).
Ключевой момент: Анализ выявляет однонуклеотидный полиморфизм (SNP) C/T в позиции -13910 относительно гена лактазы (LCT). Генотип СС ассоциирован с первичной лактазной недостаточностью взрослого типа, СТ — с частичной недостаточностью, ТТ — с лактазной персистенцией.

Диагностика заболеваний:
(См. раздел в статье по буккальному эпителию — назначение теста идентично).
Тест диагностирует первичную (врожденную, взрослого типа) лактазную недостаточность путем выявления генетической предрасположенности. Не диагностирует вторичную ЛН или врожденную алактазию.

Цель исследования:
(См. раздел в статье по буккальному эпителию — цели идентичны):
Подтверждение генетической причины ЛН, дифференциальная диагностика, определение предрасположенности, персонализация диеты, прогноз.

Что значат полученные результаты:
(Интерпретация генотипов СС, СТ, ТТ полностью идентична интерпретации, описанной в статье по анализу буккального эпителия).

Факторы, влияющие на результат:

Качество образца крови:
- Гемолиз: Сильное разрушение эритроцитов при заборе или транспортировке делает образец непригодным для выделения ДНК.
- Недостаточный объем: Мало крови — мало лейкоцитов — мало ДНК.
- Неправильный антикоагулянт: Использование пробирок не с ЭДТА (например, с цитратом или гепарином) может помешать выделению ДНК или ингибировать ПЦР.
- Неправильное хранение/транспортировка: Кровь должна транспортироваться и храниться при рекомендованной температуре (обычно +2…+8°C) и в течение определенного срока до выделения ДНК. Замораживание цельной крови с ЭДТА нежелательно.
Технические ошибки ПЦР: Аналогичны рискам при любом ПЦР-анализе (ошибки на преаналитическом или аналитическом этапе), но риск минимален в аккредитованных лабораториях.
Редкие генетические варианты: Тест специфичен к полиморфизму C/T(-13910). Он не выявляет другие, менее распространенные полиморфизмы, влияющие на активность лактазы в других популяциях.
Химеризм/Мозаицизм: После трансплантации костного мозга или стволовых клеток кровь пациента содержит лейкоциты донора. Если донор и реципиент имеют разные генотипы по LCT, результат анализа крови будет отражать генотип донора, а не реципиента. В этом случае анализ крови не пригоден для определения собственного генотипа пациента. Буккальный эпителий или другой тканеспецифичный материал будут более надежны. После переливания крови лейкоциты донора также временно присутствуют в кровотоке реципиента, что может исказить результат, если переливание было недавним. Рекомендуется сдавать кровь не ранее, чем через 1 месяц после последнего переливания.
Очень высокий лейкоцитоз или лейкопения: Крайние значения количества лейкоцитов в крови теоретически могут затруднить выделение достаточного количества ДНК, но на практике это редко является проблемой для современных методов.

Заключение:
Анализ крови на лактазную недостаточность методом ПЦР – это высоконадежный и точный метод диагностики первичной ЛН. Он особенно важен в случаях, когда использование буккального эпителия затруднено или когда есть подозрение на химеризм (после трансплантаций). Результат предоставляет объективные генетические данные для понимания причины симптомов непереносимости молочных продуктов и формирования индивидуальной диетической стратегии.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы (Лактазная недостаточность, кровь):

Циммерман Я.С. Гастроэнтерология: Руководство. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2020. — Гл. «Синдромы мальдигестии и мальабсорбции».
Ивашкин В.Т., Шелыгин Ю.А. (ред.) Рациональная фармакотерапия заболеваний органов пищеварения. — М.: Литтерра, 2011. — Раздел о ферментной недостаточности.
Heyman, M. B. (2006). Lactose intolerance in infants, children, and adolescents. Pediatrics, *118*(3), 1279–1286. (Рассматривает диагностику, включая генетические тесты).
Swallow, D. M. (2003). Genetics of lactase persistence and lactose intolerance. Annual Review of Genetics, *37*(1), 197–219. (Фундаментальный обзор генетики ЛН).
Misselwitz, B., Pohl, D., Frühauf, H., Fried, M., Vavricka, S. R., & Fox, M. (2013). Lactose malabsorption and intolerance: pathogenesis, diagnosis and treatment. United European Gastroenterology Journal, *1*(3), 151–159. (Обзор современных подходов к диагностике и лечению).