ПЦР HCV — количественный

1. Краткая История
   Количественная ПЦР для HCV внедрена в клинику в 1999 году. Первые тесты имели чувствительность 600 МЕ/мл. Современные системы (COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan, Abbott RealTime HCV) определяют вирусную нагрузку в диапазоне 10–100,000,000 МЕ/мл. Стандартизация в МЕ/мл позволяет унифицировать результаты для подбора терапии.
2. Материал, используемый для исследования

• Плазма/сыворотка (пробирка с ЭДТА).
• Объем: 4 мл крови.
• Хранение: -70°C для сохранения РНК.

3. Как подготовиться к анализу

• Аналогично количественной ПЦР HBV.
• Обязательно: Проводить после качественного ПЦР (подтверждение наличия HCV).

4. Описание метода
   ОТ-ПЦР в реальном времени:

1. Обратная транскрипция РНК в кДНК.
2. Амплификация с флуоресцентными зондами (TaqMan).
3. Количественный расчет по стандартной кривой.
   Чувствительность: 10–15 МЕ/мл.
   Линейный диапазон: 15–100,000,000 МЕ/мл.

5. Диагностика заболеваний

• Критерии для назначения терапии: Любая выявляемая виремия.
• Прогноз эффективности лечения:
  • Нагрузка >800,000 МЕ/мл – риск неудачи при коротких схемах.
  • Быстрый вирусологический ответ (РНК HCV не обнаружена на 4-й неделе) – 98% излечения.
• Оценка рецидива: Рост виремии после лечения.

6. Цель исследования

1. Определение стадии инфекции: Высокая нагрузка (>800,000 МЕ/мл) – острая фаза.
2. Мониторинг терапии:
   • Неделя 4: РНК HCV должна снизиться на 2 log10.
   • Неделя 12: РНК HCV не обнаружена (УВО12).
3. Прогноз фиброза: Виремия >400,000 МЕ/мл коррелирует с фиброзом F3-F4.

7. Что значат полученные результаты

• < 15 МЕ/мл: Вирус не обнаружен (цель лечения).
• 15–400,000 МЕ/мл: Низкая/умеренная виремия.
• > 400,000 МЕ/мл: Высокий риск фиброза.
• > 800,000 МЕ/мл: Показание к продлению терапии на 4 недели.
• Динамика:
  • Снижение на 2 log10 к 4-й неделе – хороший ответ.
  • Отсутствие снижения – смена схемы лечения.

8. Факторы, влияющие на результат

• Биологические вариации: Колебания до 0.5 log10 у одного пациента.
• Генотип HCV: Генотип 3 часто дает более высокую виремию.
• Иммунный статус: У ВИЧ-инфицированных виремия выше.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

1. AASLD/IDSA. Recommendations for Testing, Managing, and Treating Hepatitis C. 2023.
2. Pawlotsky J.M. et al. Hepatitis C virus drug resistance-associated substitutions: State of the art summary. Hepatology. 2019.
3. European Association for the Study of the Liver. EASL Recommendations on Treatment of Hepatitis C. J Hepatol. 2020.
4. Ghany M.G. et al. Hepatitis C Guidance 2019 Update: AASLD-IDSA. Hepatology. 2020.
5. WHO Guidelines for the care and treatment of persons diagnosed with chronic hepatitis C virus infection. Geneva, 2018.