450 ₽

Код анализа: 113

Заказать

ПЦР Нейссерия гонорея

ДНК Neisseria gonorrhoeae (гонококк) методом ПЦР (качественное и количественное определение)

Краткая История

Гонорея — одно из древнейших инфекционных заболеваний человека, известное со времен античности (Гиппократ, V век до н.э., описывал «гоноррею» — от греч. «gonos» — семя и «rhoia» — истечение, ошибочно считая, что это истечение семени). Возбудитель гонореи — Neisseria gonorrhoeae (гонококк) — был открыт в 1879 году немецким врачом Альбертом Найссером (Albert Neisser), который обнаружил диплококки в гное из уретры больных гонореей. В 1885 году Эрнст Бумм (Ernst Bumm) выделил чистую культуру гонококка и доказал его этиологическую роль. Долгое время «золотым стандартом» диагностики гонореи оставалась бактериоскопия (микроскопия мазка, окрашенного по Граму) — обнаружение грамотрицательных диплококков внутри лейкоцитов. Однако чувствительность бактериоскопии составляет 80-90% для уретральных мазков у мужчин, но всего 50-70% для цервикальных мазков у женщин, и она не позволяет выявлять хронические и бессимптомные формы. Культуральный метод (посев на шоколадный агар с добавками) имеет 100% специфичность, но требует 48-72 часа, специальных питательных сред и условий (CO₂-инкубатор). В 1990-2000-х годах, с развитием полимеразной цепной реакции (ПЦР), стало возможным быстрое (4-6 часов) и высокочувствительное выявление ДНК N. gonorrhoeae в урогенитальных образцах (соскоб из уретры, цервикального канала, первая порция мочи, эякулят, соскоб из ротоглотки и ануса). В 2000-2010-х годах были разработаны коммерческие тест-системы для мультиплексной ПЦР (одновременное выявление N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis), а также тесты для определения мутаций устойчивости к антибиотикам (цефалоспоринам, азитромицину, ципрофлоксацину, спектиномицину, тетрациклинам). Сегодня ПЦР на N. gonorrhoeae является методом выбора для экспресс-диагностики гонореи, особенно при бессимптомных формах, внеурогенитальных локализациях (ротоглотка, анус), у женщин, у детей.

Материал, используемый для исследования

- Тип образца:Урогенитальный соскоб (эпителиальные клетки слизистых оболочек), первая порция утренней мочи (для мужчин), соскоб из ротоглотки (при орофарингеальной гонорее), соскоб из анального канала (при аноректальной гонорее), эякулят, секрет предстательной железы, конъюнктивальный соскоб (при гонобленнорее у новорожденных).
- Локализация забора материала (в зависимости от пола и клинических проявлений):

У мужчин:Первая порция утренней мочи (10-20 мл) – неинвазивный метод, чувствительность 90-95%; соскоб из уретры (на глубину 2-4 см, более чувствителен, чем моча, но инвазивен); эякулят (при подозрении на эпидидимит, простатит).
У женщин:Соскоб из цервикального канала – основной материал; соскоб из уретры (при симптомах уретрита); соскоб из заднего свода влагалища (реже); первая порция мочи (чувствительность 85-90%).
При орофарингеальной гонорее (у мужчин и женщин):Соскоб из ротоглотки (с задней стенки глотки, с миндалин, с нёбных дужек) – важный материал, так как орофарингеальная гонорея часто протекает бессимптомно, но может быть источником заражения.
При аноректальной гонорее (у мужчин и женщин):Соскоб из анального канала (на глубину 2-3 см).
При гонобленнорее (у новорожденных):Соскоб с конъюнктивы нижнего века.
- Тип пробирки/системы сбора:Специальная пробирка с транспортной средой для ПЦР (содержит консервант, предотвращающий деградацию ДНК и рост бактерий). Используются коммерческие системы: «Инцит-тампон» (Incyte Swab), пробирки с транспортной средой для ПЦР (например, «ДНК-сорб», «АмплиСенс», «Эппендорф»). Для мочи – стерильный пластиковый контейнер с широким горлом (10-20 мл). Важно: Обычные мазки на стекле для ПЦР не пригодны (необходим транспорт для сохранения ДНК).
- Объем материала:Достаточное количество эпителиальных клеток (для соскоба) или 10-20 мл первой порции утренней мочи. Недостаточное количество клеток – причина ложноотрицательных результатов.
- Обработка:После взятия материала тампон/зонд тщательно споласкивается в транспортной среде (несколько вращательных движений), затем отжимается о стенки пробирки и удаляется. Пробирка плотно закрывается и маркируется (ФИО пациента, дата, время взятия, локализация). Доставка в лабораторию осуществляется в день взятия (или в течение 12 часов при хранении при +2…+8°C). Замораживание не допускается. Стабильность ДНК в транспортной среде при комнатной температуре – до 21 дня (в зависимости от системы сбора), при +2…+8°C – до 24-48 часов.

Как подготовиться к анализу

Подготовка к анализу критически важна для получения достоверного результата (исключение ложноотрицательных результатов и контаминации):

Женщины:

Исследование рекомендуется проводить до менструации или через 2-5 дней после её окончания.
За 3 днядо взятия материала исключить: половые контакты, вагинальные спринцевания, использование вагинальных свечей, таблеток, кремов, гелей, тампонов.
За 5-7 днейдо взятия материала прекратить использование антибактериальных препаратов местно (вагинально) и системно (внутрь, инъекционно) – после консультации с врачом (нельзя отменять жизненно важные препараты!).
В день взятия материала не проводить гигиенические процедуры с использованием антисептиков для подмывания (только чистая вода).

Мужчины:

За 3 днядо взятия материала исключить половые контакты.
За 5-7 днейдо взятия материала прекратить прием антибактериальных препаратов (после консультации с врачом).
Для соскоба из уретры:Перед взятием материала не мочиться в течение 3-4 часов.
Для первой порции утренней мочи:Собирают первую утреннюю порцию мочи (10-20 мл) после ночного сна (за 3-4 часа до сбора мочи не мочиться). Собирают в стерильный пластиковый контейнер.
Накануне и в день взятия материала не использовать антисептики для туалета половых органов.

При орофарингеальной и аноректальной локализациях:

За 2-3 часа до взятия соскоба из ротоглотки не есть, не пить, не чистить зубы, не использовать ополаскиватели для рта.
Перед взятием аноректального мазка – очистить анус (без использования антисептиков).

Общие требования:

За 2-4 неделидо исследования исключить прием антибиотиков (системно) – по согласованию с врачом (особенно цефалоспоринов – цефтриаксон, цефиксим; азитромицина; фторхинолонов – ципрофлоксацин, левофлоксацин, офлоксацин; тетрациклинов – доксициклин; спектиномицина). Гонококк очень чувствителен к цефалоспоринам, и даже однократная доза цефтриаксона может привести к ложноотрицательному результату ПЦР в течение нескольких недель.
Сообщить врачу о наличии острых инфекционных заболеваний (лихорадка, ОРВИ, ангина) – анализ следует отложить на 2-4 недели после выздоровления.
Исключить употребление алкоголя за 24 часа до исследования.
В день взятия материала не курить за 1-2 часа (по возможности).

Описание данного вещества (Neisseria gonorrhoeae и метод ПЦР)

Neisseria gonorrhoeae (гонококк) – это грамотрицательный, аэробный, неподвижный, неспорообразующий диплококк (клетки располагаются попарно, напоминая «кофейные зерна»), относящийся к семейству Neisseriaceae. Является облигатным патогеном человека (естественный резервуар – только человек, не растет вне организма, во внешней среде быстро погибает – в течение 1-2 часов). Поражает преимущественно слизистые оболочки, выстланные цилиндрическим эпителием (уретра, цервикальный канал, эндометрий, маточные трубы, прямая кишка, конъюнктива, ротоглотка). Не поражает многослойный плоский эпителий (влагалище, наружные половые органы), поэтому у взрослых женщин вагинальная гонорея не встречается (у девочек до puberty – да, так как эпителий влагалища незрелый).

Факторы вирулентности N. gonorrhoeae:

Пили (фимбрии):Обеспечивают прикрепление (адгезию) к эпителиальным клеткам, устойчивость к фагоцитозу.
Белки наружной мембраны (Por, Opa, Rmp):Участвуют в адгезии, инвазии в клетки, уклонении от иммунного ответа.
Липоолигосахарид (LOS):Эндотоксин, вызывает воспаление, повреждение тканей.
IgA-протеаза:Расщепляет секреторный IgA на слизистых, облегчая инвазию.
Антигенная изменчивость:Пили и белки Opa часто меняют свою структуру, что позволяет гонококку уклоняться от иммунного ответа и вызывает повторные инфекции (иммунитет нестерильный).

Клинические проявления гонореи:

У мужчин:

Острый уретрит (наиболее частая форма, 80-90%):Гнойные выделения из уретры (обильные, желто-зеленые), дизурия (жжение, резь при мочеиспускании), отек и гиперемия губок уретры. Инкубационный период 2-7 дней.
Хронический уретрит (при отсутствии лечения или неадекватной терапии):Скудные слизисто-гнойные выделения, дизурия (слабая), осложнения – эпидидимит (воспаление придатка яичка – боль, отек мошонки, лихорадка), простатит, стриктура уретры, бесплодие.

У женщин:

Цервицит (наиболее частая форма, 50-80%):Гнойные выделения из цервикального канала, контактная кровоточивость (кровь после полового акта, осмотра). Часто бессимптомное течение (у 50-70% женщин).
Уретрит (у 20-30% женщин):Дизурия, учащенное мочеиспускание.
Бартолинит (воспаление большой железы преддверия влагалища):Боль, отек в области входа во влагалище, гнойные выделения.
Восходящая инфекция (10-20%):Эндометрит, сальпингит (воспаление маточных труб), тубоовариальный абсцесс, пельвиоперитонит – боли внизу живота, лихорадка, нарушение менструального цикла. Осложнения – трубное бесплодие (спайки, непроходимость маточных труб), внематочная беременность, хронические тазовые боли.

Внеурогенитальные формы:

Орофарингеальная гонорея (у мужчин и женщин, при орально-генитальных контактах):Часто бессимптомно (80-90%), реже – фарингит, тонзиллит (боль в горле, гиперемия, гнойный налет).
Аноректальная гонорея (у мужчин и женщин, при анально-генитальных контактах):Часто бессимптомно (50-70%), реже – проктит (боль в анусе, выделения, тенезмы, запоры).
Гонобленнорея (у новорожденных):Конъюнктивит (отек век, обильное гнойное отделяемое) – при прохождении через инфицированные родовые пути матери. Без лечения – слепота (изъязвление роговицы).
Диссеминированная гонококковая инфекция (ДГИ, 0,5-3%):Сепсис, артрит (гнойный моноартрит), дерматит (геморрагические, пустулезные высыпания на конечностях), теносиновит (воспаление сухожилий), эндокардит, менингит. Чаще у женщин (особенно во время менструации, беременности).

Метод ПЦР (полимеразная цепная реакция):

Качественная ПЦР:Определяет наличие (обнаружено/не обнаружено) ДНК N. gonorrhoeae в образце. Чувствительность метода – 10-100 копий ДНК в пробе (или 1-10 бактерий). Специфичность – 98-100%. Позволяет выявлять гонококк даже при очень низкой бактериальной нагрузке (хронические, бессимптомные формы).
Количественная ПЦР (Real-Time PCR):Позволяет не только обнаружить ДНК N. gonorrhoeae, но и определить её количество (КОЕ/мл или геном-эквивалент/мл). Это важно для оценки эффективности лечения (снижение ДНК на фоне антибиотикотерапии), а также для дифференциации активной инфекции (высокое количество) от низкого носительства (редко).
Мультиплексная ПЦР (сочетанное выявление нескольких возбудителей):Одновременное выявление N. gonorrhoeae, Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis. Это наиболее информативный подход, так как гонорея часто сочетается с хламидиозом (30-50% случаев) и другими ИППП.
ПЦР для выявления мутаций устойчивости:Определение мутаций в генах, связанных с устойчивостью к антибиотикам (пенициллинам, тетрациклинам, фторхинолонам, макролидам, цефалоспоринам). Особенно важно для выявления устойчивости к цефтриаксону (редко, но растет) и азитромицину (растет).
Специфичность:Очень высокая (98-100%) при использовании специфических праймеров к ДНК N. gonorrhoeae (например, к генам porA, opa, 16S рРНК, cppB – но cppB может давать ложноположительные результаты у других нейссерий). Современные тест-системы используют два независимых гена-мишени (дуплексная ПЦР) для повышения специфичности.
Чувствительность:Очень высокая (90-98% для урогенитальных образцов; 85-95% для мочи; 80-90% для орофарингеальных и аноректальных мазков).

Диагностика заболеваний

Качественное (и количественное) определение ДНК Neisseria gonorrhoeae используется для:

Диагностики острой и хронической гонореи у мужчин и женщин:Это основное показание. ПЦР позволяет быстро (4-6 часов) подтвердить диагноз гонореи, даже при бессимптомном течении, при хронических формах, при неэффективности бактериоскопии (особенно у женщин, где чувствительность микроскопии низкая).
Скрининга гонореи у групп риска:Сексуально активные молодые люди (до 25-30 лет), лица с несколькими половыми партнерами, практикующие незащищенный секс, пациенты с другими ИППП (хламидиоз, сифилис, ВИЧ, трихомониаз), мужчины, практикующие секс с мужчинами (МСМ), коммерческие секс-работники. Рекомендуется ежегодный скрининг (иногда чаще – каждые 3-6 месяцев для МСМ). Скрининг включает исследование мочи (мужчины) и цервикальных мазков (женщины), а также орофарингеальных и аноректальных мазков (для МСМ).
Диагностики внеурогенитальных форм гонореи (орофарингеальная, аноректальная):Это особенно важно для мужчин, практикующих секс с мужчинами (МСМ), у которых орофарингеальная и аноректальная гонорея встречаются часто (30-50%), протекают бессимптомно, но являются источником заражения. ПЦР – метод выбора (бактериоскопия для этих локализаций имеет низкую чувствительность).
Диагностики гонобленнореи у новорожденных:ПЦР соскоба с конъюнктивы (быстро, высокочувствительно, позволяет начать лечение до получения посева).
Диагностики диссеминированной гонококковой инфекции (ДГИ):ПЦР крови (при сепсисе), синовиальной жидкости (при артрите), ликвора (при менингите), пунктата из кожных элементов.
Обследования половых партнеров:При выявлении N. gonorrhoeae у одного из партнеров, все половые партнеры за последние 60 дней должны быть обследованы и пролечены (даже при отсутствии симптомов). ПЦР – метод выбора.
Контроля излеченности после лечения:ПЦР (качественная или количественная) через 2-3 недели после окончания курса антибиотиков (более раннее исследование может дать ложноположительный результат – ДНК погибших бактерий). Цель – отрицательный результат. Важно: В отличие от хламидиоза, для гонореи контроль излеченности рекомендуется (особенно при беременности, у МСМ, при сохраняющихся симптомах, при лечении альтернативными схемами, при сомнительной комплаентности пациента).
Выявления устойчивости к антибиотикам:ПЦР с детекцией мутаций устойчивости (например, к фторхинолонам – мутации в генах gyrA, parC; к азитромицину – мутации в гене 23S rRNA; к цефтриаксону – мутации в генах penA, ponA, penB, mtrR). Это важно для выбора рациональной терапии, особенно при подозрении на устойчивость (после неэффективного лечения, у пациентов из регионов с высокой резистентностью, у МСМ).

Цель исследования

Основные цели качественного (и количественного) определения ДНК Neisseria gonorrhoeae:

Лабораторное подтверждение гонореи (урогенитальной, орофарингеальной, аноректальной)у пациентов с клиническими проявлениями (гнойные выделения, дизурия, боли) или при скрининге групп риска.
Скрининг гонореиу бессимптомных лиц из групп риска (сексуально активные молодые люди, МСМ, коммерческие секс-работники, пациенты с другими ИППП).
Диагностика внеурогенитальных форм(орофарингеальная, аноректальная) – метод выбора.
Диагностика гонобленнореи у новорожденных.
Диагностика диссеминированной гонококковой инфекции (ДГИ)– ПЦР крови, синовиальной жидкости, ликвора.
Обследование половых партнеров(за последние 60 дней).
Контроль излеченности после лечения(через 2-3 недели).
Выявление устойчивости к антибиотикам(ПЦР мутаций) для выбора рациональной терапии.

Что значат полученные результаты

Интерпретация результатов определения ДНК Neisseria gonorrhoeae всегда проводится врачом-дерматовенерологом, урологом, гинекологом, инфекционистом в контексте клинической картины (наличие гнойных выделений, дизурии, болей), а также с учетом анамнеза (половые контакты, рискованное поведение), данных бактериоскопии (при наличии), результатов других тестов (хламидиоз, сифилис, ВИЧ, трихомониаз, микоплазмоз). Референсное значение – «не обнаружено» (для качественной ПЦР) .

Референсные значения (качественная ПЦР):

Отрицательный результат («не обнаружено»):ДНК Neisseria gonorrhoeae в исследуемом образце не обнаружена (или концентрация ниже предела чувствительности метода, обычно < 10-100 копий ДНК). Гонорейная инфекция маловероятна. Однако при отрицательном результате, но наличии клинических симптомов (гнойный уретрит, цервицит) – возможно, возбудитель другой (Chlamydia trachomatis, Mycoplasma genitalium, Trichomonas vaginalis, Ureaplasma urealyticum, другие бактерии). Рекомендуется мультиплексная ПЦР.
Положительный результат («обнаружено»):ДНК Neisseria gonorrhoeae обнаружена в исследуемом образце. Указывает на наличие активной гонорейной инфекции (облигатный патоген!). В отличие от условно-патогенных микроорганизмов, N. gonorrhoeae не является частью нормальной микрофлоры ни у мужчин, ни у женщин. Обнаружение N. gonorrhoeae ВСЕГДА требует лечения (даже при отсутствии симптомов – бессимптомное носительство).

Количественная ПЦР (Real-Time PCR, количество ДНК в КОЕ/мл или геном-эквивалент/мл):

< 10^2 – 10^3 КОЕ/мл (низкая бактериальная нагрузка):Может соответствовать ранней стадии инфекции (инкубационный период), хроническому течению, бессимптомному носительству (редко), или приему антибиотиков до анализа. Лечение обязательно (N. gonorrhoeae – облигатный патоген).
10^3 – 10^5 КОЕ/мл (умеренная бактериальная нагрузка):Характерна для клинически выраженной гонореи (острый уретрит, цервицит). Требует лечения.
> 10^5 КОЕ/мл (высокая бактериальная нагрузка):Характерна для острого гнойного уретрита/цервицита, гонококковой инфекции верхних отделов половых путей (эндометрит, сальпингит, эпидидимит). Высокий риск осложнений (бесплодие, внематочная беременность). Требует немедленного лечения.
Динамика (снижение на 2-4 log через 2-3 недели после лечения):Благоприятный прогноз, эффективность терапии.
Отсутствие снижения или рост через 2-3 недели:Неэффективность лечения, устойчивость к антибиотикам.

Интерпретация в зависимости от клинической ситуации:

Положительный ПЦР + симптомы (гнойные выделения, дизурия, боли):

Интерпретация:Острая гонорея (уретрит, цервицит, проктит, фарингит). Требует немедленного лечения антибиотиками (цефтриаксон 500-1000 мг внутримышечно однократно + азитромицин 1 г внутрь однократно – по рекомендациям ВОЗ, но с учетом растущей устойчивости к азитромицину; альтернатива – цефтриаксон + доксициклин). Обследование и лечение половых партнеров (за последние 60 дней). Контроль излеченности через 2-3 недели.

Положительный ПЦР + отсутствие симптомов (случайная находка при скрининге):

Интерпретация:Бессимптомная гонорея (носительство). Лечение обязательно (те же схемы), так как бессимптомное носительство приводит к осложнениям (бесплодие, внематочная беременность у женщин, эпидидимит, простатит у мужчин), а также к передаче инфекции половым партнерам.

Положительный ПЦР (орофарингеальный мазок) + отсутствие симптомов:

Интерпретация:Орофарингеальная гонорея (часто бессимптомная). Лечение обязательно (цефтриаксон 500-1000 мг внутримышечно однократно + азитромицин 1 г внутрь однократно). Орофарингеальная гонорея труднее поддается лечению (требует более высоких доз цефтриаксона, иногда 7-дневный курс). Контроль излеченности через 2-3 недели (обязательно!).

Положительный ПЦР (аноректальный мазок) + симптомы (выделения, боль в анусе, тенезмы):

Интерпретация:Аноректальная гонорея (проктит). Лечение обязательно (те же схемы, что и для урогенитальной).

Положительный ПЦР + бесплодие (женское или мужское) или привычное невынашивание беременности:

Интерпретация:Гонорея может быть этиологической причиной бесплодия (трубное бесплодие, эпидидимит, простатит). Требует лечения обоих партнеров. После лечения – повторное обследование через 2-3 недели (ПЦР отрицательная). Планирование беременности рекомендуется не ранее, чем через 3 месяца после лечения (для восстановления проходимости труб, но трубное бесплодие может быть необратимым).

Положительный ПЦР у новорожденного (конъюнктивальный мазок):

Интерпретация:Гонобленнорея (офтальмия новорожденных). Требует немедленного лечения (цефтриаксон 25-50 мг/кг внутривенно или внутримышечно однократно, промывание глаз физиологическим раствором, местно – мазь с эритромицином или тетрациклином). Обследование матери (и её половых партнеров).

Положительный ПЦР (кровь, синовиальная жидкость, ликвор) + лихорадка, артрит, сыпь:

Интерпретация:Диссеминированная гонококковая инфекция (ДГИ). Требует госпитализации, внутривенного введения цефтриаксона 1 г в сутки 7-14 дней, иногда комбинация с азитромицином или доксициклином.

Важные нюансы интерпретации:

gonorrhoeae – облигатный патоген!В отличие от условно-патогенных микроорганизмов (Gardnerella, Mycoplasma hominis, Ureaplasma), N. gonorrhoeae не является частью нормальной микрофлоры. Обнаружение N. gonorrhoeae (даже в низком титре, даже при отсутствии симптомов) ВСЕГДА требует лечения. Исключений нет.
Ложноположительный результат:Возможен при контаминации образца (несоблюдение правил асептики, загрязнение реагентов), при использовании неспецифических праймеров (например, к гену cppB, который может быть у других нейссерий – Neisseria cinerea, Neisseria meningitidis). Современные тест-системы используют два независимых гена-мишени для исключения ложноположительных результатов. Частота ложноположительных результатов в хорошо организованных лабораториях составляет менее 0,5-1%.
Ложноотрицательный результат:Возможен при неправильном взятии материала (недостаточное количество эпителиальных клеток), при длительном хранении образца (деградация ДНК), при подавлении ПЦР (ингибиторы в образце – кровь, слизь, препараты для местного лечения), при очень низкой концентрации N. gonorrhoeae (ниже предела чувствительности), при приеме антибиотиков до анализа (особенно цефтриаксона, азитромицина, ципрофлоксацина).
Антибиотикорезистентность N. gonorrhoeae – глобальная проблема:Устойчивость к фторхинолонам (ципрофлоксацин) достигает 80-100% во многих регионах (они больше не рекомендуются). Устойчивость к азитромицину (макролидам) растет (10-30% в некоторых регионах). Устойчивость к цефтриаксону (цефалоспоринам последнего поколения) пока редка (менее 1-5%), но растет. ВОЗ рекомендует комбинированную терапию: цефтриаксон 500-1000 мг внутримышечно + азитромицин 1 г внутрь (однократно). В регионах с высокой устойчивостью к азитромицину – цефтриаксон + доксициклин (100 мг 2 раза 7 дней). Лечение должно основываться на региональных данных о резистентности. При неэффективности стандартных схем – посев с определением чувствительности к антибиотикам (антибиотикограмма) или ПЦР мутаций устойчивости.
Контроль излеченности:Проводится через 2-3 недели после окончания курса антибиотиков (качественная ПЦР). Более раннее исследование (через 1 неделю) может дать ложноположительный результат (ДНК погибших бактерий). Цель лечения – отрицательный результат. При сохраняющейся положительной ПЦР – подозрение на устойчивость к антибиотикам (требуется посев с антибиотикограммой или ПЦР мутаций).
Сочетанная инфекция с Chlamydia trachomatis:Гонорея в 30-50% случаев сочетается с хламидиозом. Поэтому при положительном ПЦР на N. gonorrhoeae рекомендуется проводить тестирование на C. trachomatis (мультиплексная ПЦР). Лечение должно охватывать оба возбудителя: цефтриаксон (против гонококка) + азитромицин (против хламидий, а также против гонококка).
Обследование половых партнеров:При выявлении N. gonorrhoeae у пациента, все половые партнеры за последние 60 дней должны быть обследованы и пролечены (даже при отсутствии симптомов). Если последний половой контакт был более 60 дней назад – обследовать последнего партнера. Лечение партнеров проводят одновременно (чтобы избежать повторного заражения – «эффект пинг-понга»). Для партнеров можно использовать эпидемиологическое лечение (без предварительного обследования) – те же схемы, что и для пациента.

Факторы, влияющие на результат

На результат определения ДНК Neisseria gonorrhoeae могут влиять различные преаналитические, аналитические и биологические факторы:

Преаналитические (до взятия материала):

Прием антибиотиковза 2-4 недели до анализа – приводит к ложноотрицательным результатам (снижение бактериальной нагрузки, разрушение ДНК). Это самый частый фактор ложноотрицательных результатов. Особенно важны цефалоспорины (цефтриаксон, цефиксим), азитромицин, фторхинолоны (ципрофлоксацин, левофлоксацин, офлоксацин), тетрациклины (доксициклин), спектиномицин.
Использование вагинальных свечей, кремов, спринцеванийза 3-5 дней до анализа – может смывать эпителиальные клетки и удалять ДНК возбудителя (ложноотрицательный результат).
Половой акт за 3 дня до анализа– может временно изменять микробиоту урогенитального тракта.
Менструация– кровь содержит ингибиторы ПЦР, может вызывать ложноотрицательные результаты. Анализ сдают после окончания менструации.
Недостаточное количество эпителиальных клетокв соскобе – причина ложноотрицательных результатов. Для мужчин – предпочтительнее первая порция утренней мочи (неинвазивно, чувствительность 90-95%).
Несоблюдение правил асептикипри взятии материала – контаминация образца посторонней ДНК (ложноположительный результат).

Аналитические (на этапе лабораторного исследования):

Контаминация реагентов и лабораторной посудыампликонами (продуктами ПЦР) – ложноположительный результат. Современные лаборатории используют системы с УФ-деконтаминацией и раздельные зоны для выделения ДНК и амплификации.
Ингибиторы ПЦРв образце (кровь, слизь, препараты для местного лечения) – ложноотрицательный результат. Требуется специальная пробоподготовка (очистка ДНК).
Нарушение температурного режима хранения транспортной среды(замораживание, перегрев) – деградация ДНК (ложноотрицательный результат).
Чувствительность тест-системы:Разные коммерческие наборы имеют разную чувствительность (10-100 копий ДНК). Высокочувствительные тесты предпочтительнее для скрининга бессимптомных форм.
Специфичность праймеров:Использование праймеров к гену cppB может давать ложноположительные результаты у других нейссерий (N. cinerea, N. meningitidis). Современные тест-системы используют два независимых гена-мишени (например, porA + opa, или porA + 16S рРНК) для повышения специфичности.

Биологические факторы:

Бессимптомное носительство: gonorrhoeae может длительно персистировать в урогенитальном тракте без симптомов (особенно у женщин). Тем не менее, обнаружение N. gonorrhoeae требует лечения.
Беременность– повышает риск диссеминированной инфекции (ДГИ). Скрининг на гонорею рекомендуется всем беременным (в I триместре и повторно в III триместре при сохранении риска).
ВИЧ-инфекция (иммуносупрессия)– может увеличивать риск диссеминированной инфекции. Скрининг на гонорею рекомендуется ВИЧ-инфицированным (как минимум 1 раз в год, чаще – каждые 3-6 месяцев при активной половой жизни).

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

Клинические рекомендации Министерства здравоохранения РФ «Гонорея». 2021.
Клинические рекомендации Министерства здравоохранения РФ «Инфекции, передаваемые половым путем (ИППП)». 2020.
Workowski K.A., Bachmann L.H., Chan P.A. et al. Sexually Transmitted Infections Treatment Guidelines, 2021. MMWR Recommendations and Reports. 2021;70(4):1-187.
World Health Organization (WHO). WHO guidelines for the treatment of Neisseria gonorrhoeae.
Unemo M., Shafer W.M. Antimicrobial resistance in Neisseria gonorrhoeae in the 21st century: past, evolution, and future. Clinical Microbiology Reviews. 2014;27(3):587-613.