450 ₽

Код анализа: 977

Заказать

ПЦР Стрептококк группы В (Streptococcus agalactiae DNA)

ДНК Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В, СГВ) методом ПЦР (качественное и количественное определение)

Краткая История

Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В) был впервые выделен в 1930-х годах как возбудитель мастита у крупного рогатого скота. В 1938 году он был впервые описан как причина послеродового сепсиса у женщин. В 1960-1970-х годах было установлено, что S. agalactiae является ведущей причиной неонатального сепсиса, пневмонии и менингита у новорожденных (как ранний – первые 7 дней жизни, так и поздний – 7-90 дней). Материнская колонизация влагалища и прямой кишки S. agalactiae является основным фактором риска инфицирования новорожденного (вертикальная передача во время родов). Долгое время «золотым стандартом» диагностики колонизации S. agalactiae у беременных был культуральный метод (посев на селективные питательные среды – агар с добавлением крови, гентамицина, налидиксовой кислоты, коломицина, а также среда Todd-Hewitt с добавками), который требует 48-72 часа. В 1990-2000-х годах, с развитием полимеразной цепной реакции (ПЦР), стало возможным быстрое (4-6 часов) и высокочувствительное выявление ДНК S. agalactiae в урогенитальных образцах (влагалищный мазок, ректальный мазок). В 2000-2010-х годах были разработаны коммерческие тест-системы для ПЦР в реальном времени (Real-Time PCR), позволяющие не только обнаруживать S. agalactiae, но и определять его количество, а также выявлять гены устойчивости к антибиотикам (макролиды, линкозамиды, тетрациклины, фторхинолоны). Сегодня ПЦР на S. agalactiae широко используется для скрининга беременных (в 35-37 недель беременности) для выявления колонизации и назначения интранатальной антибиотикопрофилактики (во время родов) для предотвращения раннего неонатального сепсиса.

Материал, используемый для исследования

- Тип образца:Урогенитальный и ректальный соскоб (эпителиальные клетки слизистых оболочек).
- Локализация забора материала:

У беременных (основное показание):Комбинированный мазок – соскоб из нижней трети влагалища (не из цервикального канала) + соскоб из перианальной области (прямой кишки) (на глубину 2-3 см). Это наиболее чувствительный метод (выявляет колонизацию у 95-98% носителей). Забор материала проводят в 35-37 недель беременности (оптимально за 4-6 недель до предполагаемых родов).
У небеременных женщин (при хронических воспалительных заболеваниях, невынашивании, перед гинекологическими операциями):Влагалищный мазок (нижняя треть влагалища) + ректальный мазок.
У мужчин (редко, при уретрите, простатите, эпидидимите):Соскоб из уретры, первая порция утренней мочи, эякулят, секрет предстательной железы.
- Тип пробирки/системы сбора:Специальная пробирка с транспортной средой для ПЦР (содержит консервант, предотвращающий деградацию ДНК и рост бактерий). Используются коммерческие системы: «Инцит-тампон» (Incyte Swab), пробирки с транспортной средой для ПЦР (например, «ДНК-сорб», «АмплиСенс», «Эппендорф»). Важно: Обычные мазки на стекле для ПЦР не пригодны (необходим транспорт для сохранения ДНК). Для мужчин – стерильный пластиковый контейнер для первой порции утренней мочи (10-20 мл).
- Объем материала:Достаточное количество эпителиальных клеток. Недостаточное количество клеток – причина ложноотрицательных результатов.
- Обработка:После взятия материала тампон/зонд тщательно споласкивается в транспортной среде (несколько вращательных движений), затем отжимается о стенки пробирки и удаляется. Пробирка плотно закрывается и маркируется (ФИО пациента, дата, время взятия, локализация). Доставка в лабораторию осуществляется в день взятия (или в течение 12 часов при хранении при +2…+8°C). Замораживание не допускается. Стабильность ДНК в транспортной среде при комнатной температуре – до 21 дня (в зависимости от системы сбора), при +2…+8°C – до 24-48 часов.

Как подготовиться к анализу

Подготовка к анализу критически важна для получения достоверного результата (исключение ложноотрицательных результатов):

Беременные (скрининг в 35-37 недель):

За 3 днядо взятия материала исключить: половые контакты, вагинальные спринцевания, использование вагинальных свечей, таблеток, кремов, гелей, тампонов.
За 5-7 днейдо взятия материала прекратить использование антибактериальных препаратов местно (вагинально) и системно (внутрь, инъекционно) – после консультации с врачом (нельзя отменять жизненно важные препараты!).
В день взятия материала не проводить гигиенические процедуры с использованием антисептиков для подмывания (только чистая вода).
Важно:Скрининг на S. agalactiae проводится однократно в 35-37 недель (даже если предыдущие посевы/ПЦР были отрицательными). Результат действителен в течение 5-6 недель. Если с момента взятия мазка прошло более 6 недель до родов – скрининг нужно повторить (особенно при преждевременных родах или при наличии факторов риска).

Небеременные женщины:

Исследование рекомендуется проводить до менструации или через 2-5 дней после её окончания.
За 3 днядо взятия материала исключить: половые контакты, вагинальные спринцевания, использование вагинальных свечей, таблеток, кремов, гелей, тампонов.
За 5-7 днейдо взятия материала прекратить использование антибактериальных препаратов местно (вагинально) и системно (внутрь, инъекционно) – после консультации с врачом.
В день взятия материала не проводить гигиенические процедуры с использованием антисептиков для подмывания (только чистая вода).

Мужчины:

За 3 днядо взятия материала исключить половые контакты.
За 5-7 днейдо взятия материала прекратить прием антибактериальных препаратов (после консультации с врачом).
Для соскоба из уретры:Перед взятием материала не мочиться в течение 3-4 часов.
Для первой порции утренней мочи:Собирают первую утреннюю порцию мочи (10-20 мл) после ночного сна (за 3-4 часа до сбора мочи не мочиться). Собирают в стерильный пластиковый контейнер.

Общие требования:

За 2-3 неделидо исследования исключить прием антибиотиков (системно) – по согласованию с врачом (особенно пенициллинов, ампициллина, амоксициллина, цефалоспоринов, макролидов, линкозамидов – клиндамицин, тетрациклинов, ванкомицина). S. agalactiae чувствителен к пенициллину, и даже короткий курс антибиотиков может привести к ложноотрицательному результату ПЦР.
Сообщить врачу о наличии острых инфекционных заболеваний (лихорадка, ОРВИ, ангина) – анализ следует отложить на 2-4 недели после выздоровления.
Исключить употребление алкоголя за 24 часа до исследования.
В день взятия материала не курить за 1-2 часа (по возможности).

Описание данного вещества (Streptococcus agalactiae и метод ПЦР)

Streptococcus agalactiae (стрептококк группы В, СГВ) – это грамположительный, факультативно-анаэробный, каталазоотрицательный, бета-гемолитический (гемолиз на кровяном агаре – зона просветления вокруг колоний) стрептококк, относящийся к группе В по классификации Лэнсфилда (на основе капсульного полисахаридного антигена). Является условно-патогенным микроорганизмом, колонизирует слизистые оболочки нижних отделов желудочно-кишечного тракта (прямая кишка) и урогенитального тракта (влагалище, уретра). У здоровых небеременных женщин колонизация S. agalactiae встречается у 10-30% (бессимптомное носительство). При беременности частота колонизации возрастает до 20-40% (из-за изменения гормонального фона, повышения pH влагалища). В большинстве случаев колонизация протекает бессимптомно и не причиняет вреда матери. Однако во время родов S. agalactiae может передаваться новорожденному (вертикальная передача) и вызывать тяжелые инфекции: ранний неонатальный сепсис (0-6 дней жизни), пневмонию, менингит, поздний неонатальный сепсис (7-90 дней). Также S. agalactiae может вызывать инфекции у взрослых (особенно у пожилых, иммунокомпрометированных, пациентов с сахарным диабетом): сепсис, пневмонию, инфекции кожи и мягких тканей, эндометрит, послеродовой сепсис, инфекции мочевыводящих путей, эндокардит, артрит, менингит.

Факторы вирулентности S. agalactiae:

Капсульный полисахарид:Основной фактор вирулентности. Выделяют 10 серотипов (Ia, Ib, II-IX). Капсула препятствует фагоцитозу, подавляет активацию комплемента.
Белок C (альфа- и бета-белки):Участвуют в адгезии к эпителию, инвазии в клетки, устойчивости к фагоцитозу.
Гемолизин (пигмент, фактор CAMP):Разрушает эритроциты, повреждает ткани. Положительная CAMP-реакция (синергизм со Staphylococcus aureus) используется для идентификации S. agalactiae.
Биопленка:Обеспечивает персистенцию на слизистых и медицинских устройствах (катетеры, протезы).
Ферменты (гиалуронидаза, нейраминидаза, ДНКаза, протеазы):Повреждают ткани, способствуют распространению инфекции.

Клиническое значение S. agalactiae в акушерстве и неонатологии:

У беременных (колонизация, 20-40%):

Бессимптомное носительство (90%).
Бактериурия (бессимптомная или симптомный цистит/пиелонефрит).
Хориоамнионит (воспаление плодных оболочек), преждевременные роды, преждевременный разрыв плодных оболочек.
Послеродовой эндометрит (лихорадка, боли внизу живота, гнойные лохии), послеродовой сепсис.

У новорожденных (вертикальная передача во время родов):

Ранний неонатальный сепсис (0-6 дней жизни, чаще в первые 24-48 часов):Пневмония (одышка, тахипноэ, цианоз), сепсис (лихорадка или гипотермия, вялость, отказ от еды, тахикардия, гипотензия), менингит (ригидность затылочных мышц, выбухание родничка, судороги). Летальность 5-20% (выше у недоношенных).
Поздний неонатальный сепсис (7-90 дней, в среднем 3-4 недели):Чаще менингит (лихорадка, вялость, раздражительность, судороги), реже – бактериемия, артрит, остеомиелит. Летальность 2-6%. Источник – колонизация при родах (вертикальная передача) или госпитальная инфекция.

Метод ПЦР (полимеразная цепная реакция):

Качественная ПЦР:Определяет наличие (обнаружено/не обнаружено) ДНК S. agalactiae в образце. Не позволяет оценить количество бактерий. Чувствительность метода – 10-100 копий ДНК в пробе. Специфичность – 98-100%. Чувствительность ПЦР (95-98%) выше, чем культурального метода (85-90%), особенно при низкой бактериальной нагрузке и при приеме антибиотиков.
Количественная ПЦР (Real-Time PCR):Позволяет не только обнаружить ДНК S. agalactiae, но и определить её количество (КОЕ/мл или геном-эквивалент/мл). Это важно для оценки степени колонизации (высокая бактериальная нагрузка > 10^5 КОЕ/мл ассоциирована с более высоким риском вертикальной передачи новорожденному). Однако для принятия решения об интранатальной антибиотикопрофилактике достаточно качественного обнаружения (любое количество).
Мультиплексная ПЦР (сочетанное выявление нескольких возбудителей):Одновременное выявление S. agalactiae, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida albicans и других. Может использоваться для комплексной оценки микробиоты влагалища.
Специфичность:Высокая (98-100%). Современные праймеры специфичны к ДНК S. agalactiae (например, к генам cfb (фактор CAMP), scpB (C5a-пептидаза), 16S рРНК, cylE (гемолизин), gbs2018) и не перекрестно реагируют с другими стрептококками (S. pyogenes – стрептококк группы А, S. pneumoniae, S. viridans, энтерококки).
Чувствительность:Очень высокая (95-98% для комбинированного влагалищно-ректального мазка). Чувствительность зависит от типа материала, стадии заболевания, приема антибиотиков.

Диагностика заболеваний

Качественное (и количественное) определение ДНК Streptococcus agalactiae используется для:

Скрининга беременных (35-37 недель беременности) для выявления колонизации S. agalactiae и назначения интранатальной антибиотикопрофилактики:Это основное и самое важное показание. Цель – предотвратить ранний неонатальный сепсис. Все беременные должны быть обследованы на S. agalactiae в 35-37 недель (независимо от предыдущих результатов). Если ПЦР положительная (или культуральный посев положительный), во время родов (с момента начала родовой деятельности или отхождения околоплодных вод) внутривенно вводят антибиотики (пенициллин G, ампициллин, при аллергии на пенициллин – цефазолин, клиндамицин, ванкомицин). Интранатальная антибиотикопрофилактика снижает риск раннего неонатального сепсиса с 1-2% до 0,1-0,2% у новорожденных от матерей-носителей.
Обследования беременных с факторами риска преждевременных родов (предшествующие преждевременные роды, преждевременный разрыв плодных оболочек, хориоамнионит):Обнаружение S. agalactiae (особенно в высоком титре) является показанием для активного ведения и антибактериальной терапии (интранатально).
Обследования новорожденных с подозрением на ранний неонатальный сепсис (одышка, лихорадка, вялость):ПЦР крови, ликвора (при подозрении на менингит), мазка из зева, ушей, пупка. Быстрый результат (4-6 часов) позволяет своевременно начать антибактериальную терапию (ампициллин + гентамицин, или ампициллин + цефотаксим).
Диагностики инфекций мочевыводящих путей (цистит, пиелонефрит) у беременных и небеременных: agalactiae является одной из причин инфекций мочевыводящих путей (5-10% случаев). ПЦР мочи (культуральный посев также используется, но ПЦР быстрее).
Обследования при невынашивании беременности, преждевременных родах, преждевременном разрыве плодных оболочек, хориоамнионите: agalactiae может быть этиологической причиной. Выявление S. agalactiae во влагалищно-ректальном мазке у женщин с этими осложнениями требует лечения.
Обследования при послеродовом эндометрите и послеродовом сепсисе:ПЦР лохий, крови (при сепсисе).
Диагностики инвазивных инфекций у взрослых (сепсис, пневмония, эндокардит, артрит, менингит) – у пациентов с сахарным диабетом, хроническими заболеваниями печени/почек, онкологическими заболеваниями, после спленэктомии, у пожилых: agalactiae является одной из причин этих инфекций (особенно у иммунокомпрометированных). ПЦР крови, ликвора, плевральной жидкости, синовиальной жидкости, абсцессов.
Обследования перед гинекологическими операциями (гистероскопия, выскабливание, аборт, установка ВМС, ЭКО):Для выявления колонизации S. agalactiae и проведения антибактериальной профилактики (для снижения риска восходящей инфекции, эндометрита, сепсиса).
Обследования половых партнеров (при рецидивирующих инфекциях, невынашивании, бесплодии): agalactiae может передаваться половым путем (но не считается классической ИППП, так как колонизация может быть и неполовой этиологии). Лечение полового партнера рекомендуется при рецидивирующих инфекциях у женщины.

Цель исследования

Основные цели качественного (и количественного) определения ДНК Streptococcus agalactiae:

Скрининг беременных (35-37 недель) для выявления колонизации и назначения интранатальной антибиотикопрофилактики (снижение риска раннего неонатального сепсиса).
Диагностика инфекций мочевыводящих путей (цистит, пиелонефрит) у беременных и небеременных.
Диагностика послеродового эндометрита и сепсиса.
Диагностика раннего и позднего неонатального сепсиса, пневмонии, менингита у новорожденных.
Диагностика инвазивных инфекций (сепсис, пневмония, эндокардит, артрит, менингит) у иммунокомпрометированных взрослых и пожилых.
Обследование при невынашивании беременности, преждевременных родах, преждевременном разрыве плодных оболочек, хориоамнионите.
Обследование перед гинекологическими операциями и манипуляциями (для профилактики послеоперационных осложнений).

Что значат полученные результаты

Интерпретация результатов определения ДНК Streptococcus agalactiae всегда проводится врачом-акушером-гинекологом, неонатологом, терапевтом, инфекционистом в контексте клинической ситуации (беременность, срок беременности, наличие симптомов инфекции мочевыводящих путей, послеродовой лихорадки, неонатального сепсиса). Референсное значение – «не обнаружено» (для качественной ПЦР) .

Референсные значения (качественная ПЦР):

Отрицательный результат («не обнаружено»):ДНК Streptococcus agalactiae в исследуемом образце не обнаружена (или концентрация ниже предела чувствительности метода, обычно < 10-100 копий ДНК). Колонизация S. agalactiae маловероятна. Однако при отрицательном результате, но наличии клинических симптомов (инфекция мочевыводящих путей, послеродовой эндометрит, неонатальный сепсис) – возможно, возбудитель другой (E. coli, другие стрептококки, стафилококки, клебсиелла). Рекомендуется культуральный посев (для идентификации возбудителя и определения чувствительности к антибиотикам).
Положительный результат («обнаружено»):ДНК Streptococcus agalactiae обнаружена в исследуемом образце. Указывает на колонизацию S. agalactiae (у беременных – показание к интранатальной антибиотикопрофилактике). agalactiae может быть частью нормальной микрофлоры (у 10-30% небеременных женщин, у 20-40% беременных), но у беременных любое обнаружение (даже в низком титре) является показанием к профилактике, так как даже низкая бактериальная нагрузка может привести к вертикальной передаче новорожденному и тяжелому неонатальному сепсису.

Количественная ПЦР (Real-Time PCR, количество ДНК в КОЕ/мл или геном-эквивалент/мл):

< 10^2 – 10^3 КОЕ/мл (низкая бактериальная нагрузка):Низкая степень колонизации. У беременных – все равно показана интранатальная антибиотикопрофилактика (риск вертикальной передачи сохраняется). Лечение (антибиотики до родов) обычно не требуется (только при инфекции мочевыводящих путей, хориоамнионите, преждевременных родах).
10^3 – 10^5 КОЕ/мл (умеренная бактериальная нагрузка):Умеренная колонизация. У беременных – интранатальная антибиотикопрофилактика обязательна.
> 10^5 КОЕ/мл (высокая бактериальная нагрузка):Высокая степень колонизации. У беременных – высокий риск вертикальной передачи (до 50-60%). Интранатальная антибиотикопрофилактика обязательна. При наличии симптомов инфекции мочевыводящих путей, хориоамнионита – лечение до родов (амоксициллин, ампициллин, цефалоспорины, макролиды – в зависимости от чувствительности).

Интерпретация в зависимости от клинической ситуации:

Беременная, 35-37 недель, положительный ПЦР (любая нагрузка), без симптомов:

Интерпретация:Бессимптомная колонизация S. agalactiae. Показана интранатальная антибиотикопрофилактика (во время родов, внутривенно пенициллин G, ампициллин или альтернативные препараты). Лечение до родов (пероральными антибиотиками) не рекомендуется (не снижает риск вертикальной передачи, но способствует развитию устойчивости). Исключение – бактериурия (даже бессимптомная) – требует лечения амоксициллином/ампициллином 7 дней.

Беременная, 35-37 недель, положительный ПЦР + симптомы инфекции мочевыводящих путей (дизурия, частые позывы, боль в пояснице, лихорадка):

Интерпретация:Цистит или пиелонефрит, вызванный S. agalactiae. Требует лечения антибиотиками (амоксициллин/ампициллин 7-10 дней, цефалоспорины, макролиды) + интранатальная антибиотикопрофилактика во время родов.

Беременная, 35-37 недель, положительный ПЦР + угроза преждевременных родов, преждевременный разрыв плодных оболочек, хориоамнионит (лихорадка, боли внизу живота, гнойные выделения):

Интерпретация: agalactiae – вероятная причина осложнений. Требует срочного лечения антибиотиками (ампициллин + гентамицин, или цефтриаксон, или эритромицин) + родоразрешение (по акушерской ситуации).

Роженица (в родах), положительный ПЦР (скрининг не проводился, или результат получен экспресс-методом):

Интерпретация:Колонизация S. agalactiae. Требует немедленной интранатальной антибиотикопрофилактики (внутривенно пенициллин G, ампициллин). Даже если роды уже начались, антибиотики вводят до рождения ребенка (за 4 часа до родов – максимальная эффективность).

Родильница (послеродовой период, лихорадка, боли внизу живота, гнойные лохии):

Интерпретация:Послеродовой эндометрит (вероятная причина – S. agalactiae). Требует лечения антибиотиками (ампициллин + гентамицин, клиндамицин + гентамицин, цефтриаксон). ПЦР лохий (или культуральный посев) для подтверждения.

Новорожденный (первые 6 дней жизни) с симптомами (одышка, лихорадка, вялость, отказ от еды):

Интерпретация:Подозрение на ранний неонатальный сепсис. Положительный ПЦР S. agalactiae (кровь, ликвор, мазки) подтверждает диагноз. Требует немедленной антибактериальной терапии (ампициллин + гентамицин, или ампициллин + цефотаксим). Длительность лечения 10-14 дней (при менингите – 14-21 день).

Новорожденный (7-90 дней) с симптомами (лихорадка, вялость, судороги):

Интерпретация:Подозрение на поздний неонатальный менингит/сепсис. Положительный ПЦР S. agalactiae (ликвор, кровь) подтверждает диагноз. Требует лечения (ампициллин + цефотаксим, или ванкомицин + цефотаксим – при неизвестной чувствительности).

Небеременная женщина (рецидивирующий бактериальный вагиноз, невынашивание, бесплодие), положительный ПЦР (высокая нагрузка, > 10^4-10^5 КОЕ/мл):

Интерпретация: agalactiae может играть этиологическую роль (особенно при рецидивах, при невынашивании). Требует лечения (амоксициллин/ампициллин 7 дней, джозамицин, клиндамицин). Лечение полового партнера – рекомендуется (хотя данные противоречивы).

Небеременная женщина (без симптомов), положительный ПЦР (низкая нагрузка, < 10^4 КОЕ/мл):

Интерпретация:Бессимптомное носительство S. agalactiae (вариант нормы, встречается у 10-30% женщин). Лечение не требуется. При планировании беременности – скрининг не ранее 35-37 недель (повторно, так как колонизация может исчезнуть и появиться вновь).

Важные нюансы интерпретации:

agalactiae – условно-патогенный микроорганизм (не облигатный патоген, в отличие от N. gonorrhoeae, C. trachomatis).У небеременных женщин и мужчин колонизация часто не требует лечения (только при симптомах, при высоком риске инфекции – иммунодефицит, сахарный диабет, перед операциями). Однако у беременных ЛЮБОЕ обнаружение S. agalactiae (даже в низком титре) является показанием к интранатальной антибиотикопрофилактике (для предотвращения раннего неонатального сепсиса).
Ложноположительный результат:Возможен при контаминации образца (несоблюдение правил асептики, загрязнение реагентов). Частота ложноположительных результатов в хорошо организованных лабораториях составляет менее 1%.
Ложноотрицательный результат:Возможен при неправильном взятии материала (недостаточное количество эпителиальных клеток, не взяли ректальный мазок – чувствительность влагалищного мазка без ректального составляет 70-80%), при длительном хранении образца (деградация ДНК), при подавлении ПЦР (ингибиторы в образце – кровь, слизь, препараты для местного лечения), при очень низкой концентрации S. agalactiae (ниже предела чувствительности), при приеме антибиотиков до анализа.
Скрининг в 35-37 недель – «золотой стандарт»:Результат действителен в течение 5-6 недель. Если роды наступают более чем через 6 недель после взятия мазка (например, при перенашивании беременности), скрининг необходимо повторить (так как колонизация может измениться). Если роды наступают до 35-37 недель (преждевременные), скрининг не проводился, но есть факторы риска (предшествующий ребенок с неонатальным сепсисом, бактериурия во время беременности, преждевременные роды в анамнезе, лихорадка в родах > 38°C) – интранатальная антибиотикопрофилактика назначается без скрининга (эмпирически).
Интранатальная антибиотикопрофилактика:Назначается внутривенно (пенициллин G 5 млн ЕД нагрузка, затем 2,5-3 млн ЕД каждые 4 часа до родов, или ампициллин 2 г нагрузка, затем 1 г каждые 4 часа). При аллергии на пенициллин (неанафилактическая) – цефазолин 2 г нагрузка, затем 1 г каждые 8 часов. При аллергии на пенициллин (анафилактическая) – клиндамицин 900 мг внутривенно каждые 8 часов, или ванкомицин (при устойчивости к клиндамицину). Профилактика эффективна, если антибиотики введены за 4 часа до родов.
Резистентность S. agalactiae к антибиотикам:К пенициллину и ампициллину резистентность отсутствует (100% чувствительность). К макролидам (эритромицин, азитромицин, джозамицин) – резистентность 10-30% (в разных регионах). К линкозамидам (клиндамицин) – резистентность 5-20%. К тетрациклинам – резистентность 80-90% (не используются). К фторхинолонам (левофлоксацин, моксифлоксацин) – резистентность 10-30%. При аллергии на пенициллин рекомендуется проводить тестирование на чувствительность к клиндамицину (или использовать ванкомицин, цефазолин).

Факторы, влияющие на результат

На результат определения ДНК Streptococcus agalactiae могут влиять различные преаналитические, аналитические и биологические факторы:

Преаналитические (до взятия материала):

Прием антибиотиковза 2-4 недели до анализа – приводит к ложноотрицательным результатам (снижение бактериальной нагрузки, разрушение ДНК). Это самый частый фактор ложноотрицательных результатов. Особенно важны пенициллины (амоксициллин, ампициллин), цефалоспорины, макролиды (азитромицин, джозамицин), клиндамицин, ванкомицин, тетрациклины, фторхинолоны.
Использование вагинальных свечей, кремов, спринцеванийза 3-5 дней до анализа – может смывать эпителиальные клетки и удалять ДНК возбудителя (ложноотрицательный результат).
Половой акт за 3 дня до анализа– может временно изменять микробиоту урогенитального тракта.
Менструация– кровь содержит ингибиторы ПЦР, может вызывать ложноотрицательные результаты. Анализ сдают после окончания менструации.
Недостаточное количество эпителиальных клетокв соскобе – причина ложноотрицательных результатов. Важно: Комбинированный влагалищно-ректальный мазок (оба участка) повышает чувствительность с 70-80% (только влагалище) до 95-98%.
Несоблюдение правил асептикипри взятии материала – контаминация образца посторонней ДНК (ложноположительный результат).

Аналитические (на этапе лабораторного исследования):

Контаминация реагентов и лабораторной посудыампликонами (продуктами ПЦР) – ложноположительный результат. Современные лаборатории используют системы с УФ-деконтаминацией и раздельные зоны для выделения ДНК и амплификации.
Ингибиторы ПЦРв образце (кровь, слизь, препараты для местного лечения) – ложноотрицательный результат. Требуется специальная пробоподготовка (очистка ДНК).
Нарушение температурного режима хранения транспортной среды(замораживание, перегрев) – деградация ДНК (ложноотрицательный результат).
Чувствительность тест-системы:Разные коммерческие наборы имеют разную чувствительность (10-100 копий ДНК). Высокочувствительные тесты предпочтительнее для скрининга беременных.
Специфичность праймеров:Должна быть высокой, чтобы не перекрестно реагировать с другими стрептококками (S. pyogenes, S. pneumoniae, S. viridans, энтерококки). Современные коммерческие наборы используют высокоспецифичные праймеры к генам cfb (CAMP-фактор), scpB, cylE, gbs2018.

Биологические факторы:

Беременность– повышает частоту колонизации S. agalactiae (20-40% против 10-30% у небеременных). Гормональные изменения, повышение pH влагалища способствуют росту стрептококков.
Сахарный диабет– повышенный риск колонизации и инвазивных инфекций.
ВИЧ-инфекция (иммуносупрессия)– повышенный риск инвазивных инфекций (сепсис, пневмония, эндокардит, менингит). Скрининг на S. agalactiae рекомендуется ВИЧ-инфицированным беременным (как и всем беременным).
Колонизация может быть транзиторной:У одной и той же женщины колонизация может исчезать и появляться вновь (поэтому скрининг в 35-37 недель, а не ранее).

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

Клинические рекомендации Министерства здравоохранения РФ «Беременность и роды при колонизации стрептококком группы В». 2021.
Клинические рекомендации Министерства здравоохранения РФ «Неонатальный сепсис». 2021.
Клинические рекомендации Министерства здравоохранения РФ «Инфекции мочевыводящих путей у беременных». 2020.
Centers for Disease Control and Prevention (CDC). Prevention of Perinatal Group B Streptococcal Disease: Revised Guidelines from CDC, 2010. MMWR. 2010;59(RR-10):1-36.
Verani J.R., McGee L., Schrag S.J. Prevention of perinatal group B streptococcal disease – revised guidelines from CDC, 2010. MMWR Recommendations and Reports. 2010;59(RR-10):1-36.