Вирус краснухи IgG + авидность — комплексное исследование

Краткая История
Развитие серодиагностики краснухи выявило проблему: положительные IgM могут сохраняться месяцами, а иногда и годами, а также давать ложноположительные результаты. Для надежного различения первичной (острой/недавней) инфекции, представляющей особую опасность при беременности, от давней инфекции, реинфекции или реактивации, требовался дополнительный критерий. В 1980-90-х годах был разработан метод определения авидности антител IgG. Авидность отражает «зрелость» и прочность связи антител с антигеном. Комплексное исследование IgG вместе с их авидностью стало «золотым стандартом» в ведении беременных с подозрением на краснуху или контактом с больным.

Материал, используемый для исследования

• Основной материал:Венозная кровь.
• Тип пробирки:Вакуумная пробирка без антикоагулянта (с активатором свертывания, «красная крышка») или с разделительным гелем («желтая крышка») для получения сыворотки крови.
• Объем:Обычно 3-5 мл крови (достаточно для проведения обоих тестов).

Как подготовиться к анализу
(Аналогично подготовке к исследованию Rubella Virus IgG):

1. Время сдачи:Утром, натощак (8-14 часов голода).
2. Голодание:Обязательно.
3. Вода:Разрешена негазированная вода.
4. Алкоголь:Исключить за 24 часа.
5. Курение:Не курить за 1-2 часа до сдачи.
6. Физические и эмоциональные нагрузки:Избегать накануне и в день анализа.
7. Лекарства:По возможности не принимать за 24 часа; сообщить врачу о необходимых препаратах.
8. Медицинские процедуры:Не сдавать после физиотерапии, массажа, рентгена, УЗИ.
9. Инфекционные заболевания:Сообщить врачу при остром заболевании или обострении хронического.

Описание данного вещества и метода (Rubella Virus IgG + Авидность)

• Rubella Virus IgG:Специфические антитела класса G, вырабатываемые иммунной системой в ответ на инфекцию или вакцинацию. Свидетельствуют о наличии иммунитета. Появляются позже IgM, сохраняются долго/пожизненно.
• Авидность IgG:Это функциональная характеристика антител IgG, отражающая прочность связывания (аффинность) множественных связей между молекулой антитела и антигенами вируса. Зрелые («старые») IgG, выработанные через несколько месяцев после первичной инфекции или вакцинации, образуют прочные комплексы с антигеном – это высокая авидность. Вновь синтезированные IgG в начале первичного иммунного ответа связываются с антигеном слабее – это низкая авидность. Авидность нарастает в течение нескольких недель-месяцев после инфицирования (процесс «созревания аффинности»).
• Метод:Определение авидности обычно проводится как дополнение к тесту на IgG методом ИФА. Сыворотку инкубируют с вирусным антигеном. Затем добавляют раствор мочевины или другого денатурирующего агента, который ослабляет слабые (низкоавидные) связи. Количество оставшихся связанными (высокоавидных) антител сравнивают с количеством антител в образце, не обработанном денатурантом. Результат выражают в виде индекса авидности (ИА) или % авидности = (ОП после обработки денатурантом / ОП без обработки) * 100%.

Диагностика заболеваний
Комплексное исследование (IgG + Авидность) имеет КРИТИЧЕСКОЕ значение для:

1. Дифференциальной диагностики первичной краснухи у беременных:
   • При положительных/сомнительных IgM и положительных IgG: Определение низкой авидности подтверждает недавнюю первичную инфекцию(высокий риск для плода). Высокая авидность исключает недавнюю первичную инфекцию (вероятна давняя инфекция, реинфекция или ложноположительный IgM).
2. Оценки риска синдрома врожденной краснухи (СВК):Низкая авидность IgG у матери в период беременности указывает на высокую вероятность недавней первичной инфекции и, следовательно, высокий риск инфицирования плода и развития СВК.
3. Уточнения срока инфицирования:Низкая авидность характерна для инфекции, перенесенной в последние 1-3 месяца. Высокая авидность указывает на инфекцию, перенесенную более 3-6 месяцев назад.
4. Различения первичной инфекции от реинфекции (повторного заражения):При реинфекции (у иммунного человека) обычно наблюдается быстрый рост титра высокоавидных IgG, IgM может не быть или быть в низком титре/кратковременно. Низкая авидность не характерна.
5. Интерпретации сомнительных или персистирующих результатов IgM:Помогает понять, отражают ли положительные IgM текущую инфекцию или являются ложноположительными/персистирующими.

Цель исследования
Основная цель комплексного исследования Rubella Virus IgG с авидностью – надежно дифференцировать недавнюю первичную инфекцию вирусом краснухи от давно перенесенной инфекции, реинфекции или неспецифической серологической реакции (особенно у беременных женщин).

Конкретные задачи:

• Оценить риск недавней первичной инфекцииу беременной женщины при наличии положительных или сомнительных антител IgM к краснухе и положительных IgG.
• Определить риск для плодав случае подозрения на заражение краснухой во время беременности.
• Уточнить срок инфицированиявирусом краснухи.
• Отличить первичную инфекцию от реинфекцииу лиц с иммунитетом.
• Подтвердить или исключить диагноз острой краснухив сложных или сомнительных случаях (особенно при персистенции IgM).

Что значат полученные результаты
Интерпретация обязательно проводится врачом с учетом всех клинических данных, срока беременности и результатов других анализов (в первую очередь, IgM). Результаты включают:

1. Rubella Virus IgG:Положительный / Отрицательный / Сомнительный + концентрация (МЕ/мл).
2. Авидность IgG:Обычно выражается в % или Индексе Авидности (ИА) и интерпретируется как:
   • Низкая авидность (<40-50%, ИА <0.3):Указывает на недавнюю первичную инфекцию (в пределах последних 1-3 месяцев). Антитела IgG «молодые», выработались недавно. Крайне важный результат у беременных: Свидетельствует о высоком риске первичной инфекции во время беременности и, следовательно, высоком риске инфицирования плода и развития СВК. Требует срочной консультации инфекциониста, генетика, акушера-гинеколога, углубленного обследования плода (УЗИ, возможна ПЦР амниотической жидкости).
   • Промежуточная (серая зона) авидность (40-60%, ИА 0.3-0.4):Результат не позволяет однозначно определить срок инфицирования. Необходимо повторить исследование через 2-4 недели. При недавней инфекции авидность будет нарастать.
   • Высокая авидность (>60%, ИА >0.4):Указывает на давнюю инфекцию (перенесенную более 3-6 месяцев назад) или реинфекцию. Антитела IgG «зрелые». У беременных: Исключает недавнюю первичную инфекцию как причину положительных IgM. Риск СВК крайне низок. Положительные IgM, скорее всего, ложные или персистирующие после давней инфекции/вакцинации. Однако реинфекция во время беременности, хотя и редко, может представлять небольшой риск для плода, особенно в первом триместре.

Важные комбинации:

• IgG (-), IgM (-):Нет иммунитета, нет текущей инфекции.
• IgG (-), IgM (+/сомнит):Возможна очень ранняя первичная инфекция (IgG еще не выработались) или ложноположительный IgM. Требуется повтор IgG и IgM через 7-14 дней.
• IgG (+), IgM (-), Высокая авидность:Надежный иммунитет (перенесенная инфекция или вакцинация в прошлом). Текущей инфекции нет.
• IgG (+), IgM (+), Низкая авидность:Высока вероятность недавней первичной инфекции (особенно опасно при беременности).
• IgG (+), IgM (+), Высокая авидность:Вероятна давняя инфекция/вакцинация с персистирующими или ложноположительными IgM. Реинфекция также возможна.

Факторы, влияющие на результат

1. Сроки взятия крови:Определение авидности информативно только при наличии положительного IgG. На очень ранних сроках инфекции IgG могут отсутствовать или быть в низком титре, авидность будет низкой, но это ожидаемо. Для дифференциации первичной инфекции кровь берут обычно не ранее 2-4 недель от начала симптомов или контакта (когда IgG уже положительны). Слишком раннее исследование может дать ложнонизкую авидность при реинфекции.
2. Индивидуальные особенности иммунного ответа:Скорость созревания авидности может варьироваться у разных людей.
3. Иммунный статус пациента:У лиц с иммунодефицитами выработка IgG и созревание их авидности могут быть нарушены.
4. Реинфекция:При повторном заражении иммунного человека обычно быстро вырабатываются высокоавидные IgG. Низкая авидность для реинфекции не характерна.
5. Тест-система:Пороговые значения для низкой/высокой авидности (% или ИА) могут отличаться у разных производителей тест-систем. Интерпретировать результат нужно только по референсам используемой системы.
6. Гемолиз, хилез, иктеричность сыворотки:Могут влиять на точность измерения оптической плотности в ИФА, искажая расчет индекса авидности.
7. Технические ошибки:Преаналитические (неправильное хранение/транспортировка) и аналитические ошибки.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

1. Клинические рекомендации (протокол) оказания медицинской помощи больным корью, краснухой и эпидемическим паротитом. Минздрав России. — 2021 (или актуальная редакция).
2. Лобзин Ю.В., Волжанин В.М., Захаренко С.М. и др. Руководство по инфекционным болезням с атласом инфекционной патологии. — СПб: Фолиант, 2011. — Раздел «Краснуха».
3. Enders, G., Knotek, F. Rubella IgG Avidity. In: Diagnostic Procedures for Viral, Rickettsial and Chlamydial Infections / Edited by E.H. Lennette, D.A. Lennette, E.T. Lennette. — 7th ed. — Washington, DC: American Public Health Association, 1999. — P. 807–812.
4. Thomas, H.I.J., Morgan-Capner, P. Rubella diagnosis using avidity of IgG. In: Morgan-Capner P. (ed.) Current Topics in Rubella. — London: Royal Society of Medicine Press, 1998. — P. 41–46.
5. De Paschale, M., Agrappi, C., Manco, M.T., et al. Seroepidemiology of rubella: an Italian 17-year experience. Epidemiol Infect. 2011;139(10):1539-47. [Пример статьи, где используется авидность].