Анализ: Фемофлор-16 (оценка биоценоза урогенитального тракта) в Луганске

Краткая История:
Понимание микробиоты человека как сложной экосистемы, играющей ключевую роль в здоровье и болезни, привело к развитию методов ее детального анализа. Культуральные методы, имея свои достоинства, не способны идентифицировать значительную часть трудно культивируемых или некультивируемых микроорганизмов. Появление высокопроизводительных молекулярно-генетических методов, таких как секвенирование нового поколения (NGS) и мультиплексные количественные ПЦР-тесты, открыло новую эру в изучении микробиома. Фемофлор-16, разработанный в России (ООО «ДНК-Технология»), является одним из лидеров в области комплексной количественной оценки урогенитального биоценоза у женщин методом ПЦР в реальном времени. Он позволяет получить детальную картину микробного сообщества, выходящую далеко за рамки стандартных тестов.

Материал, используемый для исследования:
Аналогично Фемофлор Скрин, используется соскоб эпителиальных клеток со слизистой оболочки заднебокового свода влагалища. Забор производится стерильным одноразовым зондом-щеточкой в пробирку с транспортной средой для сохранения ДНК.

Как подготовиться к анализу:
Подготовка идентична требованиям для Фемофлор Скрин и других урогенитальных ПЦР-тестов:

Время сдачи:7-14 дни менструального цикла. Не во время менструации и не ранее 2 дней после ее окончания.
Воздержание:За 48 часов до анализа исключить:
- Половые контакты.
- Вагинальные исследования (УЗИ, кольпоскопия).
- Спринцевания, использование любых вагинальных препаратов (свечи, таблетки, кремы, тампоны).
Гигиена:Вечером накануне – обычное подмывание без спринцевания. Утром в день сдачи подмывание не проводится.
Медикаменты:Отмена местных антибактериальных, противогрибковых средств за 7 дней. Отмена системных антибиотиков за 4 недели до исследования (по согласованию с врачом).

Описание данного исследования:
Фемофлор-16 – это расширенный мультиплексный тест на основе ПЦР в реальном времени, который количественно определяет ДНК 16 групп микроорганизмов, а также общую бактериальную массу и контроль взятия материала:

Контроль взятия материала (КВМ):Количество ДНК человека (ген RNase P). Критерий качества забора (> 10^4 копий ДНК).
Общая бактериальная масса (ОБМ):Количественная оценка всей бактериальной ДНК в образце.
Нормальная флора:
- Lactobacillus spp.(Лактобактерии) — ключевой компонент нормоценоза.
Условно-патогенные микроорганизмы (УПМ):Сгруппированы по их роли в дисбиозе:
- Облигатно-анаэробные бактерии:
  - Gardnerella vaginalis/ Prevotella bivia / Porphyromonas spp.
  - Eubacterium spp.
  - Sneathia spp./ Leptotrichia spp. / Fusobacterium spp.
  - Megasphaera spp./ Veillonella spp. / Dialister spp.
  - Lachnobacterium spp./ Clostridium spp.
  - Mobiluncus spp./ Corynebacterium spp.
  - Peptostreptococcus spp.
  - Atopobium vaginae
  - Bacteroides spp./ Prevotella spp. (кроме bivia)
- Факультативно-анаэробные бактерии:
  - Staphylococcus spp.(Стафилококки)
  - Streptococcus spp.(Стрептококки)
  - Enterobacterium spp.(Энтеробактерии: E.coli, Klebsiella, Proteus и др.)
- Микоплазмы:
  - Mycoplasma hominis
  - Ureaplasma (urealyticum + parvum)
- Грибы:
  - Candida spp.(Грибы рода Кандида, все виды)

Диагностика заболеваний:
Фемофлор-16 предназначен для углубленной оценки биоценоза влагалища при:

Сложных и рецидивирующих формах бактериального вагиноза (БВ):Выявление всего спектра анаэробных бактерий, ассоциированных с БВ, и оценка их вклада.
Аэробных вагинитах (АВ):Диагностика вагинитов, вызванных избыточным ростом факультативных анаэробов (стафилококки, стрептококки, энтеробактерии).
Смешанных вагинитах (БВ + АВ):Выявление сочетания анаэробного и аэробного компонентов дисбиоза.
Кандидозном вульвовагините:Выявление и количественная оценка грибов рода Candida (всех видов, а не только albicans).
Оценке состояния микробиоты при уреаплазмозе/микоплазмозе:Определение количества Ureaplasma spp. и hominis и их соотношения с нормальной и условно-патогенной флорой для решения вопроса о необходимости лечения.
Неустановленных причинах вагинального дискомфорта,воспаления, выделений при отрицательных результатах рутинных тестов.
Контроле восстановления микрофлорыпосле лечения антибиотиками.
Обследовании перед гинекологическими операциямии ЭКО для минимизации риска инфекционных осложнений.
Бесплодии и невынашивании беременности(по показаниям, как часть обследования).

Цель исследования:
Основные цели Фемофлор-16:

Комплексная оценка состояния биоценоза влагалища:Получение детальной количественной картины микробного сообщества, включая нормофлору, широкий спектр УПМ и грибы.
Точная диагностика типа дисбиоза:Дифференциация между БВ, АВ, смешанными формами и кандидозом на основании преобладающих групп микроорганизмов.
Количественная оценка всех значимых компонентов микрофлоры:Определение абсолютного (ГЭ) и относительного (% от ОБМ) количества каждой группы бактерий и грибов.
Определение степени дисбиотических нарушений:Расчет индексов (например, Индекс дисбиоза), объективно отражающих тяжесть нарушения микрофлоры.
Выявление ассоциаций микроорганизмов:Идентификация специфических микробных профилей, характерных для различных патологических состояний.
Оценка уровня колонизации Ureaplasma spp. и Mycoplasma hominis:Определение их клинической значимости в конкретном случае на фоне общей картины биоценоза.
Контроль эффективности терапии и восстановления нормофлоры:Объективный мониторинг динамики показателей после лечения.
Индивидуализация терапии:Назначение лечения, направленного на коррекцию выявленного специфического дисбаланса микрофлоры.

Что значат полученные результаты:
Отчет Фемофлор-16 содержит подробную таблицу и графическое представление данных:

КВМ и ОБМ:Интерпретация как в Фемофлор Скрин. Низкий КВМ – недопустим.
Количественные показатели (Абсолютные — ГЭ и Относительные — %):По каждой из 16 групп микроорганизмов.
- Lactobacillus spp.:Норма – доминирование (высокий % и абсолютное количество > 10^6 ГЭ). Снижение указывает на дисбиоз.
- Группы облигатных анаэробов:Превышение пороговых значений абсолютных и/или относительных показателей характерно для БВ. Определенные комбинации (например, vag/P.biv/Porph + A.vag + Megasphaera/Veillonella/Dialister) являются высокоспецифичными маркерами БВ.
- Группы факультативных анаэробов (Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Enterobacterium spp.):Значимое увеличение (особенно относительного вклада) характерно для Аэробного Вагинита (АВ).
- Mycoplasma hominis, Ureaplasma spp.:Оценивается абсолютное количество (ГЭ). Значимым обычно считается >= 10^4 — 10^5 ГЭ, особенно при наличии клинических симптомов воспаления и отсутствии других явных причин. Низкие титры (< 10^4 ГЭ) часто расцениваются как носительство. Интерпретация всегда в контексте общей картины биоценоза и клиники.
- Candida spp.:Абсолютное количество >= 10^3 — 10^4 ГЭ обычно свидетельствует о кандидозе.
Интерпретация состояния биоценоза:На основе анализа всех данных тест выдает заключение:
- Нормоценоз:Доминирование лактобактерий, низкий уровень УПМ.
- Промежуточный тип:Умеренное снижение лактобактерий, умеренное повышение некоторых УПМ. Пограничное состояние.
- Дисбиоз (вагиноз):Резкое снижение или отсутствие лактобактерий, значительное повышение облигатных анаэробов (БВ).
- Дисбиоз (вагинит):Резкое снижение лактобактерий, значительное повышение факультативных анаэробов (АВ) или грибов (кандидоз).
- Смешанный дисбиоз:Сочетание признаков БВ и АВ, или БВ/АВ и кандидоза.
Индекс Дисбиоза (ИД):Рассчитываемый показатель, интегрирующий соотношение лактобактерий и УПМ:
- ИД = 0 (Норма)
- ИД = 1-2 (Умеренный дисбиоз)
- ИД = 3-4 (Выраженный дисбиоз)

Факторы, влияющие на результат:
Факторы аналогичны Фемофлор Скрин, с акцентом на:

Нарушение подготовки и забора:Главные причины недостоверных результатов или искажения количественных показателей (особенно ложноотрицательные результаты или занижение).
Транспортировка и хранение:Критично для сохранности ДНК.
Ингибиторы ПЦР:Могут влиять на количественную точность.
«Мертвая» ДНК:После лечения антибиотиками ДНК погибших микроорганизмов может определяться, давая ложное представление о текущей инфекции. Контроль – не ранее 4 недель.
Ограничение спектра:Хотя панель широкая, она не охватывает все микроорганизмы (например, вирусы, некоторые редкие бактерии или грибы). Не выявляет Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, Trichomonas vaginalis, Mycoplasma genitalium (это задачи Фемофлор Скрин или специфических ПЦР).
Качественные транспортные среды и реагенты:Необходимы для точного выделения ДНК всех групп микроорганизмов.
Калибровка оборудования:Точность количественной ПЦР требует регулярной калибровки амплификаторов.

Заключение:
Фемофлор-16 представляет собой мощный инструмент для углубленной и объективной оценки состояния урогенитального биоценоза у женщин. Он превосходит рутинные методы по широте охвата микрофлоры, точности количественной оценки и способности дифференцировать сложные формы дисбиоза. Этот тест незаменим при рецидивирующих инфекциях, неэффективности стандартного лечения, для персонализированного подхода к коррекции микрофлоры и контроля восстановления нормоценоза. Он предоставляет врачу детальную «микробную карту» пациента, являясь основой для принятия взвешенных клинических решений.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

Долгушина В.Ф., Гомберг М.А., Аполихина И.А. и др. Применение теста Фемофлор для оценки биоценоза влагалища. Акушерство и гинекология. 2013; (6): 85-90. (Русский)
Прилепская В.Н., Байрамова Г.Р., Долгушина В.Ф. Современные возможности оценки микробиоценоза влагалища. Гинекология. 2015; 17(3): 4-9. (Русский)
Ravel, J., Gajer, P., Abdo, Z., Schneider, G. M., Koenig, S. S., McCulle, S. L., … & Forney, L. J. (2011). Vaginal microbiome of reproductive-age women. Proceedings of the National Academy of Sciences, 108(Supplement 1), 4680-4687.
Macklaim, J. M., Fernandes, A. D., Di Bella, J. M., Hammond, J. A., Reid, G., & Gloor, G. B. (2013). Comparative meta-RNA-seq of the vaginal microbiota and differential expression by Lactobacillus iners in health and dysbiosis. Microbiome, 1(1), 1-13.
Petrova, M. I., Lievens, E., Malik, S., Imholz, N., & Lebeer, S. (2015). Lactobacillus species as biomarkers and agents that can promote various aspects of vaginal health. Frontiers in physiology, 6, 81.