ПЦР HCV — качественный

1. Краткая История
   Качественная ПЦР для HCV разработана в 1991 году. Первый тест с чувствительностью 1,000 копий/мл. Современные методы (например, COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan) обнаруживают РНК HCV при виремии 5–15 МЕ/мл. Используется для подтверждения активной инфекции, особенно при сомнительных серологических результатах.
2. Материал, используемый для исследования

• Плазма/сыворотка (пробирка с ЭДТА).
• Объем: 4 мл крови.
• Обработка: Центрифугирование в течение 4 часов, хранение при -70°C.

3. Как подготовиться к анализу

• Аналогично качественной ПЦР HBV.
• Важно: Не проводить при гемолизе – РНК быстро деградирует.

4. Описание метода
   ОТ-ПЦР (Обратная транскрипция + ПЦР):

1. Выделение РНК.
2. Синтез кДНК с помощью обратной транскриптазы.
3. Амплификация участков генома HCV (5′-UTR, Core).
   Детекция:

• Электрофорез: Визуализация продуктов амплификации.
• Флуоресцентные зонды: Повышение чувствительности до 10 МЕ/мл.

5. Диагностика заболеваний

• Подтверждение острого гепатита C: При отрицательных anti-HCV.
• Диагностика хронической инфекции: У anti-HCV-позитивных пациентов.
• Обследование новорожденных: Отличие материнских антител от инфекции.
• Контроль излеченности: После терапии качественная ПЦР – основной критерий УВО.

6. Цель исследования

1. Верификация активной репликации HCV: При положительных anti-HCV.
2. Диагностика серонегативного гепатита C: Редкие случаи отсутствия антител.
3. Контроль УВО (устойчивого вирусологического ответа): Необнаружение РНК HCV через 12–24 недели после терапии.
4. Скрининг донорской крови: Обнаружение РНК в «серологическом окне».

7. Что значат полученные результаты

• «Обнаружено»:
  • Активная HCV-инфекция.
  • Требуется количественный ПЦР и генотипирование.
• «Не обнаружено»:
  • Пациент здоров (при отсутствии anti-HCV).
  • Успешное излечение после терапии (УВО).
  • Ложноотрицательный результат возможен при:
    • Виремии <5 МЕ/мл.
    • Нарушении преаналитики (деградация РНК).

8. Факторы, влияющие на результат

• Нестабильность РНК: Требует быстрой обработки образца.
• Ингибиторы ПЦР: Гепарин, гемоглобин.
• Аутоиммунный гепатит: Ложноположительные результаты редки.

Лаборатория Бойченко гарантирует точность и достоверность результатов благодаря современному оборудованию и высоким стандартам качества.

Список литературы:

1. Chevaliez S. et al. Clinical utility of HCV core antigen detection in the diagnosis and monitoring of hepatitis C infection. J Clin Virol. 2018.
2. European Association for the Study of the Liver. EASL Recommendations on Treatment of Hepatitis C. J Hepatol. 2020.
3. CDC. Testing for HCV Infection: An Update of Guidance. MMWR. 2020.
4. WHO Guidelines on hepatitis C testing. Geneva, 2017.
5. Pawlotsky J.M. Diagnostic testing in hepatitis C virus infection. Clin Liver Dis. 2019.